詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1370 |
商品介紹:
名稱 小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 2.組織來源:臍帶組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離自臍帶;臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當(dāng)卵黃囊及其血管退化,臍動脈和臍靜脈就發(fā)達(dá)起來,在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì)。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。最后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走,某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細(xì)胞,干細(xì)胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細(xì)胞,結(jié)出各種不同的果實——血液細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細(xì)胞群體;這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量,又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞,從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞。在不同的誘導(dǎo)條件下,可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞,并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用;目前,多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞,存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長因子,促進(jìn)造血干細(xì)胞(HSC)的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用,可減輕移植物抗宿主?。?/span>GVHD)及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞采用組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 實驗室分離的小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M238 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
CFHR2 / FHR2 / HFL3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
VASN / Vasorin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
LMAN2L 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FcERI / FCER1A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
MFAP5 / MAGP2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
B3GNT2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 SCARB3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 JAM-2 / JAM-B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 JAM-2 / JAM-B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞小鼠ⅩAnti-PHF1 Antibody人GTP活化蛋白(GAP)elisa定量檢測試劑盒
人角蛋白17Anti-PHF3 Antibody人STAT蛋白抑制因子3(PIAS3)elisa定量檢測試劑盒
大鼠糖皮質(zhì)類固受體Anti-PGLS Antibody人心肌鈣黏蛋白(H-Cadherin)elisa定量檢測試劑盒
大鼠黃體生成素釋放Anti-PHAX Antibody人Preptin 蛋白(Preptin)elisa定量檢測試劑盒
人制瘤素M受體Anti-PHF3 Antibody人β淀粉樣前體蛋白(βAPP)elisa定量檢測試劑盒
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子Anti-PHKB Antibody人β甘露糖苷(β Manase)elisa定量檢測試劑盒
小鼠前心鈉肽Anti-PHKA1 Antibody人Hedgehog相互作用蛋白(HHIP)elisa定量檢測試劑盒
大鼠8異前列腺素Anti-PHKG1 Antibody人原鈣黏素γA2(PCDHγA2)elisa定量檢測試劑盒