詳細介紹
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。 1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。 2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。 3. 細胞傳代 1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。 |
公司細胞現(xiàn)貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠脾淋巴細胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | GOY-01X1154 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 小鼠脾淋巴細胞 2.組織來源:脾臟 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠脾淋巴細胞分離自脾臟組織;脾臟是機體最大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞,是機體細胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,與9-11肋相對,長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,前方有胃,后方與左腎、左腎上腺毗鄰,下端與結腸脾溝相鄰,地柔軟的網(wǎng)狀內皮細胞器官。淋巴細胞(lymphocyte)白細胞的一種,由淋巴器官產(chǎn)生,機體免疫應答功能的重要細胞成分。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異,可分為中樞淋巴器官(又名初級淋巴器官)和周圍淋巴器官(又名次級淋巴器官)兩類。前者包括胸腺、腔上囊或其相當器官(有人認為在哺乳動物是骨髓)。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細胞,成熟后將其轉送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結等。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠脾淋巴細胞采用機械研磨法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠脾淋巴細胞經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M153 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖;不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞特點及處理:
產(chǎn)品特點: 1、 使用方便:不需昂貴設備。 2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 | 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細胞培養(yǎng)技巧:
一、凍存時的注意事項: 1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。 4. 冷凍保存的細胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。 4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。
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下列是公司正銷售的產(chǎn)品:
RSPO1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
EGFL8 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
CYP1A1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
GADD45G 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
CD64 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
ICAM-1 / CD54 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
小鼠 MMP-9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
MMP-9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
KDM4B 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
小鼠脾淋巴細胞玫瑰紅鈉瓊脂平板(9cm) 英文名稱:Rose Bengal Medium 產(chǎn)品規(guī)格:10個/包
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Muscle, skeletal receptor tyrosine-protein kinase
0.156-10 ng/mL 人BMX非受體絡激(BMX)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 3
15.6-1000 pg/mL 人β-Klotho蛋白(BKL)ELISA試劑盒
腸球菌顯色培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1000ml
改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Martin Agar Medium ,Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Protein S100-A11
0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Wilms tumor protein 1-interacting protein
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Corticosterone