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          HAL-01 (淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-08 16:08:14瀏覽次數(shù):996

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0575 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          HAL-01 (淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) 的相關(guān)*:大鼠PGES基因甲基化檢測試劑盒 20次
          大鼠COX-1基因甲基化檢測試劑盒 20次
          小鼠p16基因甲基化檢測試劑盒 20次
          大鼠p16基因甲基化檢測試劑盒 20次
          小鼠PR基因甲基化檢測試劑盒 20次
          小鼠ERβ基因甲基化檢測試劑盒 20次

          詳細(xì)介紹

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產(chǎn)品屬性:  

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          HAL-01 (淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0575

          商品介紹:

          名稱    HAL-01 (淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)   

          別稱HAL01; HAL-1

          種屬人類

          年齡(性別)女性,17

          組織來源B細(xì)胞前體白血病

          生長特性懸浮細(xì)胞

          細(xì)胞形態(tài)淋巴細(xì)胞樣

          背景描述Established from the peripheral blood of a 17-year-old woman with acute lymphoblastic leukemia (ALL-L2) in 1990; contains the t(17;19)(q22;p13) TCF3-HLF (E2A-HLF) fusion gene

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

          推薦傳代比例5×10^5-1×10^6cells/mL

          推薦換液頻率2~3/

          倍增時間~48小時

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO2,5%

          溫度:37℃

          注意事項該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請注意離心收集細(xì)胞懸液;請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

          QQ截圖20210907103850.png

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           C2orf40 基因全長ORF克隆

           OLFML1 基因全長ORF克隆

           DCBLD2 基因全長ORF克隆

           IDO2 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

           CLGN 基因全長ORF克隆

           CTGF 基因全長ORF克隆

           SCG5 基因全長ORF克隆

           APCS 基因全長ORF克隆

           RNASE11 基因全長ORF克隆

           SAR1B 基因全長ORF克隆

          HAL-01 (淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) 0.156-10 ng/mL 人核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1(NUSAP1)ELISA試劑盒

          APT肉湯 英文名稱:APT Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

          0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Indian hedgehog protein

          GVPC瓊脂平板 英文名稱:GVPC Agar Plate 產(chǎn)品規(guī)格:10個/包

          0.187-12 ng/mL 人Atonal蛋白的同源蛋白1(ATOH1)ELISA 試劑盒

          62.5-4000 pg/mL 人α2-纖溶抑制因子ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL 人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒

          改良EC肉湯(mEC+n)顆粒 英文名稱:Modified EC Broth 產(chǎn)品規(guī)格:225ml/袋*10

          5%乳糖發(fā)酵管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

          0.156-10 ng/mL 人離子型N-甲基D-天冬谷受體(GRIN1)ELISA試劑盒

           

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