操作步驟:
1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本40μL(即樣本5倍);空白對(duì)照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書操作洗板)。
6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對(duì)照孔不加。
7、溫育:重復(fù)4的操作。
8、洗板:重復(fù)5的操作。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。
12、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以倍數(shù)。
注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他檢測(cè)試劑盒請(qǐng)咨詢銷售人員。
產(chǎn)品全稱:PKN2 蛋白激酶N2elisa試劑盒原理
英文名稱:Protein Kinase N2(PKN2)ELISA Kit
貨號(hào):GOY-01E12389
規(guī)格:48T/96T
服務(wù):可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),以及產(chǎn)品說(shuō)明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑 1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證",每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。 2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測(cè)定需求。 | 二、樣本 1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等; 類風(fēng)濕因子的控制方法: ①用F(ab)2替代完整的IgG; ②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理; ③檢測(cè)抗原時(shí),可用加入到標(biāo)本中使RF降解。 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
1 g Spermidine.trihvdrochloride(nNOS抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
TPY瓊脂培養(yǎng)基 TPY Agar Medium 250g 0.78-50 ng/mL 人生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)ELISA試劑盒
2 ug pEYFP-mem pEYFP-mem 低溫運(yùn)輸,-20℃保存頭孢他啶進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Ceftazidime3毫克/支×5添加于100mlHB4155
HBI腸桿菌科細(xì)菌生化鑒定條(GB) 5條/盒 15.6-1000 pg/mL 人鈣調(diào)理蛋白2(Calponin-2)ELISA試劑盒
2 ug pCMV6 entry pCMV6 entry 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
250U 核酸外切 T Exonulease T -20℃保存葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Dextrose Peptone Medium用于生物制品無(wú)菌試驗(yàn)250
2 ug pDsRed-ER pDsRed-ER 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.625-40 ng/mL 人α乳白蛋白(Alpha-lactalbumin)ELISA試劑盒
5g L- L-Ornithine 室溫干燥避光保存 0.156-10 ng/mL 人H-ras/GTPase HRas ELISA試劑盒
1瓶 NFS-60株 NFS-60 低溫運(yùn)輸和保存
100mL Imidazole Buffer(咪唑緩沖液),0.5M,pH6.5 Imidazole Buffer,0.5M,pH6.5 常溫保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Succinate-semialdehyde dehydrogenase, mitochondrial
鈉瓊脂基礎(chǔ) NaHCO3 Agar Base 250g 0.312-20 ng/mL 人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒
PKN2 蛋白激酶N2elisa試劑盒原理EMP2 上皮細(xì)胞膜蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-IKKi/IKKe(Thr500) 磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激i抗體 規(guī)格: 0.1ml
CRP(C11F2) C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體 規(guī)格: 0.1mlMLL5 髓系/淋巴混合譜系白蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml
beta-Actin (Loading Control) β-肌動(dòng)蛋白抗體(內(nèi)參抗體) 0.1mlGoat anti-rat IgG whole serum 羊抗大鼠IgG抗清 規(guī)格: 1ml
phospho-CK8 (Ser23) 磷酸化細(xì)胞角蛋白8抗體 規(guī)格: 0.1mlCA15-3/Muc1 粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml
CDH18 鈣粘附分子18抗體 規(guī)格: 0.2mlCARD4 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
GP1B/CD42b 小板糖蛋白GPIb抗體 規(guī)格: 0.2mlBLK/MODY11 B淋巴細(xì)胞酪氨酸激抗體 規(guī)格: 0.1ml
ACTR1A (α/β-centractin) 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlTMEM147 跨膜蛋白147抗體 規(guī)格: 0.2ml
P53 protein(wt-p53) 瘤抑制基因P53蛋白抗體(野生型P53) 規(guī)格: 0.1mlCyclin G2 周期素G2抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-IRS1(Tyr895) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格: 0.1mlORP150 氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體 規(guī)格: 0.2ml
Lumican 基膜聚糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlNeuroligin 1 突觸細(xì)胞粘附分子1抗體 規(guī)格: 0.2ml