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          大鼠表皮角化細(xì)胞

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          更新時(shí)間:2022-04-22 11:48:11瀏覽次數(shù):284

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) GOY-01X1158 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          大鼠表皮角化細(xì)胞的相關(guān)*:動(dòng)物細(xì)胞醛酮還原1D(aldo-keto reductase 1D)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          動(dòng)物細(xì)胞醛酮還原1E(aldo-keto reductase 1E)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          動(dòng)物組織醛酮還原1A(aldo-keto reductase 1A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          動(dòng)物組織醛酮還原1B(aldo-keto reducta

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品介紹:

          名稱    大鼠表皮角化細(xì)胞

          2.組織來源:皮膚組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          大鼠表皮角化細(xì)胞分離自皮膚組織;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞(KC)是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分,在體內(nèi)處于不斷增殖過程中,分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層,少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移,細(xì)胞的分化程度逐漸增加,并喪失分裂活性。

          5.方法簡(jiǎn)介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮角化細(xì)胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測(cè):

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠表皮角化細(xì)胞經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

          培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

          產(chǎn)品貨號(hào)CM-R154

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性貼壁

          細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

          傳代特性可傳1-2

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO25%

          公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

          產(chǎn)品名稱

          大鼠表皮角化細(xì)胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號(hào)

          GOY-01X1158

          細(xì)胞特點(diǎn)及處理:

          產(chǎn)品特點(diǎn):

          1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

          2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

          3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。

          4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

          5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

          6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。

          7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

          8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

          細(xì)胞處理:

          1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

          2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

          1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

          2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

          3.6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

          4.將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          QQ截圖20210907103850.png

           

          細(xì)胞培養(yǎng)技巧:

          一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng):

          1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 %最佳

          2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。

          3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽

          滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。

          4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度:

          4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml

          4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。

          4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml

          4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

          5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。

           

          使用方法:

          收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

          1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          3. 細(xì)胞傳代

          1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

          2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

           

          下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

           CD140b / PDGFRb 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

           LEP R 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽

          小鼠 CCL2 / MCP-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

           IL23R 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

          小鼠 EIF2C2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

           MMP-9 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

           ALK-1 / ACVRL1 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

          甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

          小鼠 HMGB1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽

           IGFII / IGF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

          大鼠表皮角化細(xì)胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Scavenger receptor cysteine-rich type 1 protein M130

          0.312-20 ng/mL 人補(bǔ)體因子P(CFP)ELISA試劑盒

          接種測(cè)試微生物瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Medium Ⅱ(for Transferring the Test Organism) 產(chǎn)品規(guī)格:250g

          EF-18瓊脂 英文名稱:EF-18 Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

          0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Neural cell adhesion molecule L1

          78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Asprosin

          0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Dual specificity protein phosphatase 9

          M肉湯 英文名稱:M Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10ml*20支/包

          0.78-50 ng/mL 人間α-抑制因子重鏈H1(ITI-HC1)ELISA試劑盒

          15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Biopterin

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