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          大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-22 11:18:39瀏覽次數(shù):258

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) GOY-01X1144 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞的相關(guān)*:組織膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          食物膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          羥脯(HYP)含量高效液相色譜定量檢測(cè)試劑盒 20次
          細(xì)胞羥賴(hydroxylisine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          組織羥賴(HYL)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
          體液羥賴(HYL)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次

          詳細(xì)介紹

          公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

          產(chǎn)品名稱

          大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞

          規(guī)格

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          貨號(hào)

          GOY-01X1144

          產(chǎn)品介紹:

          名稱    大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞

          2.組織來(lái)源:前列腺

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性*的性腺器官;前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過(guò),扼守著尿道上口,所以,前列腺有問(wèn)題時(shí),排尿首先受影響。前列腺是機(jī)體非常少有的,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構(gòu)成精液主要成分;作為內(nèi)分泌腺,前列腺分泌的激素稱為前列腺素"。前列腺平滑肌細(xì)胞是前列腺的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。前列腺平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

          5.方法簡(jiǎn)介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測(cè):

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

          產(chǎn)品貨號(hào)CM-R149

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長(zhǎng)特性貼壁

          細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

          細(xì)胞特點(diǎn)及處理:

          產(chǎn)品特點(diǎn):

          1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

          2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

          3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。

          4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

          5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

          6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。

          7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

          8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

          細(xì)胞處理:

          1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

          2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

          1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

          2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

          3.6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

          4.將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          QQ截圖20210907103850.png

           

          細(xì)胞培養(yǎng)技巧:

          一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng):

          1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 %最佳

          2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。

          3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽

          滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。

          4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度:

          4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml

          4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。

          4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。

          4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml

          5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。

           

          下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

           CLEC4F 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

           BMP15 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

           HFE 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

           RAET1G 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

           CLEC12A 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

           BTLA 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

           CLEC3A 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

           NEUROG3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

           IFNL3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

           MAP3K7 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

          大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞31.2-2000 pg/mL 人腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒

          62.5-4000 pg/mL 人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白12(LCN12)ELISA試劑盒

          0.156-10 ng/mL 人Dickkopf相關(guān)蛋白1( Dickkopf-1))ELISA試劑盒

          15.6-1000 pg/mL 人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Synaptophysin

          15.62-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Inorganic pyrophosphatase

          0.156-10 ng/mL 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒

          1.56-100 ng/mL 人ADTRP ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL 人白介素7受體α亞基(IL-7RA)ELISA試劑盒

          0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Cardiac phospholamban

          使用方法:

          收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

          1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          3. 細(xì)胞傳代

          1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

          2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

           

           


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