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          大鼠腸道干細(xì)胞

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-22 11:52:56瀏覽次數(shù):258

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號(hào) GOY-01X1161 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          大鼠腸道干細(xì)胞的相關(guān)*:線蟲β-半乳糖苷原位染色試劑盒 50次
          線蟲β-半乳糖苷化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒 20次
          線蟲β-半乳糖苷比色法定量檢測試劑盒 20次
          線蟲基因組DNA分離試劑盒 20次
          果蠅細(xì)胞培養(yǎng)基 500毫升
          果蠅細(xì)胞凍存試劑盒 50次

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品屬性: 

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號(hào)

          大鼠腸道干細(xì)胞

          5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X1161

          商品介紹:

          名稱    大鼠腸道干細(xì)胞 

          2.組織來源:腸組織

          3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          4.細(xì)胞簡介:

          大鼠腸道干細(xì)胞分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸道干細(xì)胞(ISC)也稱腸道上皮干細(xì)胞,主要位于腸黏膜隱窩內(nèi),其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān)。正常情況下,位于隱窩基底部的腸道干細(xì)胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,整個(gè)遷移過程大約3-5d,在遷移過程中腸道干細(xì)胞分化形成不同的腸黏膜細(xì)胞。當(dāng)受到外界生理或病理信號(hào)作用時(shí),ISC可持續(xù)增殖、分化為成熟腸上皮細(xì)胞,如腸型細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞等,從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。

          5.方法簡介:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸道干細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化后,用腸道干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質(zhì)量檢測:

          實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸道干細(xì)胞經(jīng)MSI-1免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          7.培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

          產(chǎn)品貨號(hào)CM-R155

          換液頻率每2-3天換液一次

          生長特性懸浮

          細(xì)胞形態(tài)球形

          傳代特性可傳3代左右

          消化液0.25%胰蛋白酶

          培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

          冷凍保存細(xì)胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

          1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

          5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

           PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

          小鼠 FGF12 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽

          小鼠 CHK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

           CHK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

          甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

          甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

          甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

          甲型流感 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

          甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

          甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

          大鼠腸道干細(xì)胞皮質(zhì)素1抗體Human GLP2(Glucagon Like Peptide 2) ELISA Kit大鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒,

          8號(hào)染色體開放閱讀框70抗體Human GLUT2(Glucose Transporter 2) ELISA Kit豬傳染性胃腸炎病抗體(TGEV)ELISA試劑盒,

          胰羧肽E抗體Human GKN1(Gastrokine 1) ELISA Kit兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA試劑盒,

          化角蛋白18抗體Human GLUT4(Glucose Transporter 4) ELISA Kit兔功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒,

          20號(hào)染色體開放閱讀框112抗體Human GM-CSF Ab(Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit魚類狀腺原(T3)ELISA試劑盒,

          10號(hào)染色體開放閱讀框88抗體Human Glyoxalase I(GLO1) ELISA Kit抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人

          富含半胱C端蛋白1抗體Human GNβ1(G Protein Beta 1) ELISA Kit膽硫乳瓊脂(DHL)

          E1A激活基因激蛋白2抗體Human GP-73(Golgi Protein 73) ELISA Kit麥芽浸膏湯   用于酸性罐頭食品商業(yè)無檢驗(yàn)

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