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          TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細胞)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-06 12:02:47瀏覽次數(shù):375

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
          貨號 GOY-01X0233 應用領域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
          TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細胞)的相關*:SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體腹腔法動物轉(zhuǎn)染試劑盒 5次
          SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體局灶法動物轉(zhuǎn)染試劑盒 5次
          動物細胞β-半乳糖苷活性化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 20次
          β-半乳糖苷標準曲線化學發(fā)光法測定試劑盒 20次
          動物組織β-半乳糖苷活性化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 20次
          細胞β-半乳糖苷原位染色試劑盒 100次

          詳細介紹

          實驗要點及說明:

          1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

          2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

          4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

          產(chǎn)品屬性:  

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細胞)

          1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

          GOY-01X0233

          商品介紹:

          名稱    TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細胞)  

          別稱TM-3

          種屬小鼠

          年齡(性別)雄性,11-13

          組織來源睪丸間質(zhì)

          生長特性貼壁細胞

          細胞形態(tài)上皮細胞樣

          背景描述TM3細胞在LH作用下cAMP產(chǎn)量升高,但對促卵泡激素沒有響應。TM3細胞對LH的響應持續(xù)時間與血清批次有關;在LH存在下,TM3細胞可以代謝膽固醇。

          生物安全等級1

          生長培養(yǎng)基DMEM/F125% HS2.5% FBS1% P/S

          推薦傳代比例1:3-1:4

          推薦換液頻率2~3/

          凍存條件

          凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

          溫度:液氮

          培養(yǎng)條件

          氣相:空氣,95%CO2,5%

          溫度:37℃

          致瘤性No, The cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice, but did form colonies in semisolid medium.

          受體表達情況luteinizing hormone (LH); epidermal growth factor (EGF); androgen receptor, positive; e種屬ogen receptor, positive; progesterone receptor, positive

          基因表達情況prostaglandin F2a

          注意事項該細胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔;換液時需預熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細胞團,為正常現(xiàn)象,請按照收貨注意事項處理。

          冷凍保存細胞之方法?

          冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

          冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          牛窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

          β-轉(zhuǎn)導素重復序列包含蛋白(BTRC)免疫試劑盒進口、組裝

          蛋白體(prosome,macropain)亞基,β型,1(PSMB1)免疫試劑盒進口、分裝

          大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)免疫試劑盒進口、分裝

          犬胰島素樣因子3(INSL3)免疫試劑盒進口、組裝

          CXC趨化因子受體7(CXCR7)免疫試劑盒*直銷

          低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒*直銷

          馬皮質(zhì)酮(CORT)免疫試劑盒進口、組裝

          總蛋白S(TPS)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

          小鼠RAR的相關孤獨受體C(RORC)免疫試劑盒進口、組裝

          TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細胞)2 ug pCMV-SPORT6 SNAP25 pCMV-SPORT6 SNAP25 低溫運輸,-20℃保存

          波爾頓選擇性肉湯 Bolton Broth 250g

          2 ug pN3 pN3 低溫運輸,-20℃保存

          50T 溶血性鏈球菌ACR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

          1 g L-Citrulline(NO中間體) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

          25mL E.coli Sample Buffer  E.coli Sample Buffer  常溫保存

          100mL BLOTTO溶液 BLOTTO Solution -4℃保存(不能保存在-20℃)

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