公司動(dòng)態(tài)
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書中陰性本底的形成原因
閱讀:532 發(fā)布時(shí)間:2017-11-13elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書酶聯(lián)固相免疫實(shí)驗(yàn)中,尤其在簡(jiǎn)介ELISA試劑盒法中,經(jīng)常會(huì)碰到陰性本底的問題。主要是本底過高和不同標(biāo)本的本底值差異較大。本底或稱背景,是ELISA試劑盒中的非特異性顯色。底物未經(jīng)過酶作用而呈現(xiàn)的顏色稱為空白。底物液如配制不當(dāng)會(huì)出現(xiàn)一定的空白值。這個(gè)空白值只要不太高(A<0.05),可從個(gè)測(cè)定值中減除,并不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。這里研究的是不含待測(cè)抗原或抗體的陰性標(biāo)本在ELISA試劑盒中出現(xiàn)的本底。從理論上講,只有陽性標(biāo)本zui終才能引出顯色反應(yīng),在以下情況
因此除在包被時(shí)有目的地使抗原或抗體吸附在載體上,在ELISA試劑盒各個(gè)步驟中均有可能發(fā)生干擾物質(zhì)的吸附,使zui終產(chǎn)生與受檢抗原-抗體反應(yīng)無關(guān)的顯色,這是形成本底的主要原因。
在酶免疫測(cè)定中,ELISA試劑盒的特點(diǎn)是利用固相載體作為分離游離和結(jié)合的酶結(jié)合物的手段。固相載體與吸附在其上的抗原會(huì)抗體形成固相抗原或固相抗體,即免疫吸附劑。通常所用的固相載體聚苯乙烯其表面主要是疏水基團(tuán),通過疏水鍵與蛋白質(zhì)結(jié)合。之中吸附式物理性的非特異性吸附,雖然蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等對(duì)吸附的量有一定的影響,但總的來說各種蛋白質(zhì)均能吸附在聚苯乙烯載體的表面。因此需要更加專業(yè)的儀器。新BioCel裝置可以將細(xì)胞均勻分裝在多孔板中,ELISA試劑盒并執(zhí)行一系列倒去孵育液,加入新鮮溶液的操作。許多中間過程,包括細(xì)胞培養(yǎng)基的倒去和吸光度的檢測(cè)都可以自動(dòng)進(jìn)行。
加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
25mg Arsanilic Acid 98-50-0 阿散酸標(biāo)準(zhǔn)品
25mg 963-39-3 氯氮草相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
25mg 95399-71-6 福辛普利相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
25mg Lorazepam Related Compound C 93955-15-8 勞拉西泮相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品
25mg 86-98-6 氯喹相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
25mg 86150-61-0 萬乃洛韋相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品
25mg 85933-17-3 卡比多巴相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
25mg 82419-52-1 氧氟沙星相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
25mg 82240-09-3 2E, 4E-己二烯酸異丁酰胺標(biāo)準(zhǔn)品
25mg 821-48-7 環(huán)磷酰胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書