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解析進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗失敗的原因
閱讀:226 發(fā)布時間:2017-7-28進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒新手zui一開始了解的就是其原理,大家都知道這一實驗常用的固相酶免疫測定方法。由于ELISA方法靈敏,特異性強不需要特殊設(shè)備,所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。
ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗中除正常反應(yīng)外,有時??梢姷揭恍╁e誤結(jié)果如標(biāo)本的影響,對這一方面我司來為大家細(xì)細(xì)解讀:
1. 溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì),在洗滌過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧,從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍(lán)色,產(chǎn)生假陽性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。
2. 標(biāo)本受細(xì)菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
3. 標(biāo)本保存不當(dāng)。在冰箱中保存過久的標(biāo)本,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,ELISA試劑盒測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩。
塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。使用真空采血管;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會增加OD值,EDTA、酶抑制劑可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性。
標(biāo)本凝固不全。 在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
右旋安非他命相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱: 規(guī)格: 25mg CAS號: 103-79-7
喹那普利相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱: 規(guī)格: 50mg CAS號: 103733-49-9
鹽酸昂丹司瓊對照品標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱: Ondansetron Hydrochloride 規(guī)格: 300mg CAS號: 103639-04-9
琥珀酸舒馬曲坦標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱: Sumatriptan Succinate 規(guī)格: 200mg CAS號: 103628-48-4
舒馬曲坦標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱: Sumatriptan 規(guī)格: 50mg CAS號: 103628-46-2
紫外光吸收劑UV-360標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱: Bisoctrizole 規(guī)格: 200mg CAS號: 103597-45-1
進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒