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人補(bǔ)體7抗體（C7 Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理
閱讀：130 發(fā)布時間：2017-7-18| 提 供 商 | 上海谷研實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 64KB |
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| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 130次 |
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人補(bǔ)體7抗體(C7 Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理：
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：96T
1.2μg/ml -50μg/ml
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中補(bǔ)體7抗體(C7 Ab)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人補(bǔ)體7抗體(C7 Ab)水平。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入補(bǔ)體7抗體(C7 Ab)，再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的補(bǔ)體7抗體(C7 Ab)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人補(bǔ)體7抗體(C7 Ab)濃度。
人補(bǔ)體7抗體(C7 Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人補(bǔ)體7抗體(C7 Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.人補(bǔ)體7抗體(C7 Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。