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人神經母細胞瘤細胞；SK-N-BE(2)培養(yǎng)如何處理
閱讀：100 發(fā)布時間：2024-9-5收到人神經母細胞瘤細胞；SK-N-BE(2)培養(yǎng)如何處理？
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。接下來，對于SK-N-BE(2)這種特定的人神經母細胞瘤細胞系，我們還需要特別注意其生長環(huán)境的細微調整。由于SK-N-BE(2)細胞對溫度、濕度及CO2濃度較為敏感，確保細胞培養(yǎng)箱設定為37°C、5% CO2濃度及飽和濕度至關重要。此外，考慮到該細胞系可能存在的特定生長偏好，如偏好高糖培養(yǎng)基或需要特定的生長因子支持，應根據(jù)實驗需求調整培養(yǎng)基配方。
在傳代過程中，為了避免細胞污染和保持細胞活力，所有操作都應遵循嚴格的無菌技術。使用一次性無菌吸管和移液器，確保培養(yǎng)基、胰酶等試劑在有效期內且未受污染。傳代時，輕柔地處理細胞，避免過度吹打導致細胞損傷。
同時，為了監(jiān)控細胞的生長狀況和健康狀態(tài)，除了定期拍照記錄外，還可以利用細胞計數(shù)儀進行細胞密度的精確測量。這有助于更科學地評估傳代時機，確保細胞在最佳狀態(tài)下進行擴增。
此外，考慮到長期培養(yǎng)可能引起的細胞特性改變或污染風險，建議定期進行細胞系的鑒定和污染檢測，如通過流式細胞術分析細胞表面標記物，或使用PCR方法檢測支原體、真菌等微生物污染，確保實驗結果的準確性和可靠性。
綜上所述，對于SK-N-BE(2)人神經母細胞瘤細胞的培養(yǎng)，除了遵循基本的細胞培養(yǎng)流程外，還需根據(jù)細胞特性進行細致入微的調整和監(jiān)控，以確保細胞健康生長，為后續(xù)的科學研究提供高質量的細胞材料。