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研究利器ImageXpress Pico開啟小兒呼吸道感染研究大門
| 重磅：：科學(xué)家使用ImageXpress Pico證實在急性呼吸道病毒感染中，富含ha的ECM的形成促進(jìn)了促炎癥環(huán)境的形成。ImageXpress Pico本身具有高分辨率成像功能和強(qiáng)大的分析能力，加上其緊湊小巧的設(shè)計風(fēng)格正是 “小身材，大能耐”的真實寫照。 |
| 西雅圖兒童研究所*席研究員，西雅圖兒童醫(yī)院肺科和睡眠內(nèi)科主治醫(yī)師Stephen R. Reeves博士說：“ImageXpress Pico系統(tǒng)使我們的團(tuán)隊能夠準(zhǔn)確有效地評估肥大細(xì)胞與RSV感染的人肺成纖維細(xì)胞（HLFs）的結(jié)合特性，并更好地了解RSV的炎癥反應(yīng)。 |
| 研究挑戰(zhàn)——了解RSV感染的HLFs外基質(zhì)中肥大細(xì)胞（mast cells）和透明質(zhì)酸（hyaluronan，HA）的結(jié)合特征 呼吸道合胞病毒(RSV)是世界范圍內(nèi)感染兒童*常見的病毒之一。病毒的輕度病例僅限于上呼吸道(鼻子和喉嚨)炎癥；更嚴(yán)重的病例會延伸到下呼吸道(支氣管和肺)，并伴有咳嗽、低燒和食欲不振。 |
| 更嚴(yán)重的RSV感染可發(fā)展為肺炎、呼吸衰竭和或死亡。RSV具有高度傳染性，主要影響兒童。然而，成年人和那些免疫系統(tǒng)較弱的人也易被影響。RSV的癥狀和傳播與影響上呼吸道和下呼吸道的其他病毒類似，包括甲型和乙型流感病毒、鼻病毒、腺病毒以及冠狀病毒株COVID-19。 更多地了解這些病毒的潛在機(jī)制有助于闡明潛在的治療方案。西雅圖兒童研究所、華盛頓大學(xué)和貝納羅亞研究所的研究人員著手研究RSV的一種潛在機(jī)制。 |
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| Stephen Reeves博士和他的伙伴設(shè)計了幾個實驗來確定RSV感染的HLFs中肥大細(xì)胞和HA之間相互作用的下游炎癥效應(yīng)。為此需要用活細(xì)胞和固定的細(xì)胞做細(xì)胞熒光成像來測試摸索一系列的條件，包括包括HA在細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)中的位置和作用機(jī)制，肥大細(xì)胞蛋白表達(dá)，以及HA、肥大細(xì)胞和ECM之間的分子相互作用。傳統(tǒng)的熒光顯微鏡成像需要使用玻璃蓋片對細(xì)胞進(jìn)行固定，這將浪費(fèi)更多的時間。Reeves博士和他的團(tuán)隊需要一種更有效的方式去更有效的獲得高質(zhì)量的活細(xì)胞和固定組織圖像。 |
| 解決方法——高分辨率的活細(xì)胞和固定細(xì)胞熒光成像和分析 研究團(tuán)隊選擇了ImageXpress®Pico自動細(xì)胞成像系統(tǒng)，因為其易用性、靈活性和強(qiáng)大的分析能力。 |
| 分析方法 為了幫助該團(tuán)隊快速開展實驗，我們的現(xiàn)場應(yīng)用科學(xué)家和技術(shù)支持專家為不同的分析提供了現(xiàn)場培訓(xùn)和支持。這包括了實驗方案和動態(tài)分析，這樣就可以同時成像和分析。 |
| 圖像獲取研究小組進(jìn)行了活細(xì)胞成像，然后固定組織，對細(xì)胞外基質(zhì)成分進(jìn)行染色，而這些成分在活細(xì)胞中是不可視的。在ImageXpress Pico用多孔板進(jìn)行成像，減少了與樣品處理相關(guān)的時間。圖像采集過程中，大面積的感興趣區(qū)域可以通過高倍鏡下的拼接模式獲取。這樣的成像方式既減少了額外的熒光顯微鏡重復(fù)驗證工作，同時還可以得到高質(zhì)量圖片。 |
結(jié)果分析Reeves博士和他的伙伴能夠定量分析肥大細(xì)胞和感染了RSV的HLFs的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)之間的相互作用，圖片和分析數(shù)據(jù)如下：  |
| ImageXpress Pico系統(tǒng)還用于分析RSV感染的HLFs在48小時內(nèi)TSG-6的表達(dá)和肥大細(xì)胞粘附的影響。 圖片和分析數(shù)據(jù)如下：（注：TSG-6是一種與炎癥相關(guān)的蛋白，在RSV感染的細(xì)胞中表達(dá)上調(diào))。 |
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| ImageXpress Pico自動細(xì)胞成像系統(tǒng) 產(chǎn)品使用 ImageXpress Pico是一個穩(wěn)定的、可靠的自動細(xì)胞成像系統(tǒng)，適于實驗臺面操作 。這臺儀器專為個體生物實驗室或高通量篩選應(yīng)用而設(shè)計，其緊湊的設(shè)計風(fēng)格結(jié)合了儀器本身高分辨率成像功能和強(qiáng)大的分析能力給到客戶所有層面的成像體驗?；诩?xì)胞分析，系統(tǒng)擁有強(qiáng)大的預(yù)設(shè)程序模板，以及先進(jìn)的功能，如數(shù)字共焦。無論您是在做固定細(xì)胞或活細(xì)胞的熒光或明場成像，只需單擊幾下鼠標(biāo)就可以開始成像和生成數(shù)據(jù)。 |
| 結(jié)果高質(zhì)量的數(shù)據(jù)有助于科學(xué)取得更快的突破 Reeves博士使用ImageXpress Pico*證實： l 在感染RSV的兒童捐贈者來源的HLFs中，HA的合成更強(qiáng)，從而產(chǎn)生富含HA的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM) l 富含HA的ECM促進(jìn)肥大細(xì)胞更強(qiáng)的黏附，增加肥大細(xì)胞蛋白酶的釋放，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)(如氣道收縮、粘液生成、咳嗽) l RSV感染的HLFs表現(xiàn)出肥大細(xì)胞炎癥介質(zhì)的表達(dá)增加，以及肥大細(xì)胞黏附增加 研究結(jié)果表明，在急性呼吸道病毒感染中，富含ha的ECM的形成促進(jìn)了促炎癥環(huán)境的形成。這一機(jī)制對RSV等呼吸道病毒的干預(yù)治療具有深遠(yuǎn)的意義。 |
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| 總結(jié)：研究總結(jié):該研究表明，感染RSV的HLFs誘導(dǎo)了合成HA的酶的上調(diào)(HAS 2和3)，同時下調(diào)了分解HA的酶(HYAL 2)，這導(dǎo)致了細(xì)胞外基質(zhì)中HA的增加和肥大細(xì)胞的粘附。此外，RSV感染的HLFs顯示TSG-6表達(dá)增加，增強(qiáng)了肥大細(xì)胞與ECM的結(jié)合。與RSV誘導(dǎo)的ECM結(jié)合的肥大細(xì)胞可以上調(diào)肥大細(xì)胞蛋白酶的表達(dá)，促進(jìn)促炎癥環(huán)境的形成。 |
| Stephen R. Reeves博士認(rèn)為：“ImageXpress Pico系統(tǒng)不斷改進(jìn)以滿足我們不斷變化的需求，并為進(jìn)一步的發(fā)現(xiàn)打開了大門。我們很期待接下來會發(fā)生什么!” Reeves博士和其他通訊作者是Dr. Jason Debley實驗室成員的一部分。Debley實驗室利用流行病學(xué)、臨床和分子方法來了解兒童早期哮喘的進(jìn)化，并研究在兒童哮喘中氣道上皮的作用。西雅圖兒童研究所免疫和免疫療法中心的研究人員調(diào)查了一些影響人類免疫系統(tǒng)的*具挑戰(zhàn)性的兒童疾病。終的目標(biāo)是利用免疫學(xué)的治療力量來設(shè)計新的疾病治療方法。 |