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          目錄:愛(ài)必信(上海)生物科技有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)>>細(xì)胞檢測(cè)>> abs9252支原體染色檢測(cè)試劑盒

          支原體染色檢測(cè)試劑盒
          • 支原體染色檢測(cè)試劑盒
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 absin
          • 型號(hào) abs9252
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

          供貨周期:現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域:生物產(chǎn)業(yè)

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          更新時(shí)間:2024-07-08 20:25:22瀏覽次數(shù):1518評(píng)價(jià)

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          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
          支原體染色檢測(cè)試劑盒可用于在培養(yǎng)細(xì)胞中對(duì)支原體或其它原核生物進(jìn)行原位染色檢測(cè)。主要用于檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中是否存在支原體污染。
          產(chǎn)品描述
          描述

          支原體染色檢測(cè)試劑盒可用于在培養(yǎng)細(xì)胞中對(duì)支原體或其它原核生物進(jìn)行原位染色檢測(cè)。主要用于檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中是否存在支原體污染。

          培養(yǎng)細(xì)胞中的細(xì)菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn),但支原體污染在光學(xué)顯微鏡下不可見(jiàn),必須通過(guò)特定的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)。

          檢測(cè)支原體污染的方法有很多種,包括支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測(cè)、RT-PCR檢測(cè)以及DNA熒光染色檢測(cè)。該試劑盒是通過(guò)Hoechst染色來(lái)檢測(cè)支原體,可快速、有效、高靈敏度地檢測(cè)支原體污染。
          如果發(fā)現(xiàn)有支原體污染,建議更換無(wú)污染的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。該試劑盒如用于六孔板樣品檢測(cè),至少可以檢測(cè)100個(gè)樣品。
           
          支原體染色檢測(cè)試劑盒組分:
          貨號(hào)品名包裝
          A組分固定液100mL
          B組分Hoechst染色液10mL
          C組分抗熒光淬滅封片液10mL
          使用方法
          使用說(shuō)明:
          1、細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:
          (1)對(duì)于貼壁細(xì)胞,在六孔板或其它多孔板內(nèi)或蓋玻片上培養(yǎng)細(xì)胞至 50%-80%滿。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)滿會(huì)導(dǎo)致很難判斷是否存在支原體污染。
          (2)對(duì)于懸浮細(xì)胞,離心沉淀細(xì)胞,取少量細(xì)胞做細(xì)胞涂片,空氣中充分晾干。
          2、用 PBS 按照 1:10 稀釋 Hoechst 染色液(1 體積 Hoechst 染色液加入 9 體積 PBS)。稀釋后的 Hoechst 染色液宜在 24h 內(nèi)使用。
          3、加適量固定液固定 10~20min。 對(duì)于六孔板的一個(gè)孔,加入 1mL 固定液。確保固定液充分覆蓋樣品,固定前切勿對(duì)細(xì)胞進(jìn) 行洗滌。對(duì)于貼壁細(xì)胞,固定前需去除培養(yǎng)液。
          4、去除固定液,空氣中晾干。
          5、加適量 10 倍稀釋的 Hoechst 染色液室溫染色 10~30min。 對(duì)于六孔板的一個(gè)孔,加入 1mL 染色液。確保染色液充分覆蓋樣品,染色時(shí)注意避光??梢杂娩X箔紙避光。
          6、去除染色液,空氣中晾干。
          7、滴加試劑盒中提供的抗熒光淬滅封片液,封片后熒光顯微鏡下觀察藍(lán)色熒光。 熒光顯微鏡觀察時(shí)需 400 倍或 1000 倍放大觀察(需使用油鏡)。 沒(méi)有支原體污染或其它原核生物污染的細(xì)胞樣品,僅觀察到細(xì)胞核的藍(lán)色熒光,線粒體 DNA 不會(huì)被染色。

          有支原體污染的細(xì)胞樣品可觀察到細(xì)胞核周?chē)⒘罨蚪z狀藍(lán)色熒光。 支原體污染嚴(yán)重的細(xì)胞可以觀察到大量微粒狀或絲狀藍(lán)色熒光。

          有細(xì)菌、酵母或霉菌污染的情況雖然 Hoechst 染色也會(huì)呈陽(yáng)性,但細(xì)菌、酵母或霉菌污染在 光學(xué)顯微鏡下可以觀察到,而支原體觀察不到,由此可以初步區(qū)分是支原體還是其它微生物。

          如有必要進(jìn)一步鑒定,可以通過(guò)把支原體接種培養(yǎng)和 RT-PCR 等方法進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)。
          注意事項(xiàng)
          1、Hoechst 染色試劑對(duì)人體有害,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
          2、固定液含有冰乙酸,有刺激性氣味,宜在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行固定操作。
          3、熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
          4、檢測(cè)支原體前最好用不含抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng) 2~3 代,這樣更容易檢測(cè)出支原體,因?yàn)橐恍┛股乜梢砸种浦гw生長(zhǎng)。
          基本信息
          儲(chǔ)存/保存方法
          2~8℃避光保存,有效期12個(gè)月。
          溫馨提示:本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用,不支持臨床等研究

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