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愛必信的無血清細胞凍存液采用*配方用于維持細胞存活的微環(huán)境，該產(chǎn)品成分明確，無血清無蛋白組分，無需程序降溫，可一步實現(xiàn)細胞凍存，保護細胞免受冰晶和溶質損傷，可有效提高細胞復蘇活率和活力。適用于干細胞、免疫細胞等多種細胞的冷凍保存。

產(chǎn)品特點：

成分明確，無血清，無動物源組分，安全性高。

即取即用，無需配制。

無需程序降溫，一步實現(xiàn)細胞凍存。

外觀

無色透明澄清溶液

技術指標

DMSO含量：10%

內(nèi)毒素：< 1 EU/ml

產(chǎn)品用途

用于-80℃、-196℃冷凍保存常用細胞系，不含蛋白質和任何動物源成分。

使用方法

準備細胞：

1、檢查并確認細胞沒有真菌、細菌、支原體污染。

2、凍存前的細胞處于增殖旺盛的對數(shù)生長期 。

3、計數(shù)待凍存的細胞數(shù)量。懸浮細胞應 180g 離心 5~10min 后除去培養(yǎng)基，貼壁細胞應消化后計數(shù)，再 180g 離心除去培養(yǎng)基以獲得細胞沉淀。

細胞凍存：

1、首先確定細胞適宜的凍存密度和體積，計算應使用的本凍存液體積。

注意：可使用的凍存密度為 1~10×106 /ml，推薦凍存密度為 2~5×106 /ml。凍存體積為 0.5~1ml/管。

2、吸取適量凍存液重懸細胞，使用前產(chǎn)品應當 2~8℃預冷。細胞重懸后應當立即分裝至細胞凍存管。

3、經(jīng)凍存液重懸后的細胞不能在室溫或 2~8℃靜置超過 10 min 以上，應當盡快將凍存管移入-80℃低溫冰箱，不采取任何程序降溫措施或使用程序降溫裝置。如果無法立即移入-80℃低溫冰箱，至少應當先移入低于 0℃環(huán)境中（如-20℃冰箱）短暫存放 10 min 左右，同樣不采取程序降溫。

4、-80℃冰箱過夜后的凍存管，若長期儲存，可移入液氮罐中保存。若短期取用，可于-80℃短期保存數(shù)月，保存時間、效果因細胞類型而不同。

注意：初次使用本產(chǎn)品凍存的細胞類型，應測試保存時間和效果后再使用。

細胞復蘇：

1、先準備室溫或 37℃預溫好的*培養(yǎng)基，其體積為凍存液體積的 9 倍。

2、取出液氮或-80℃中的凍存管，置于 37℃水浴并不斷輕搖。待剩余 1 粒米大小的冰塊時，迅速移出水浴。

3、立即吸取凍存液至*培養(yǎng)基中，輕柔吹打 3~5 次混勻。然后，180g 離心 5~10 分鐘，獲得細胞沉淀備用。

4、加入適量新鮮培養(yǎng)基，使用移液管緩慢懸浮細胞，并將細胞轉染細胞培養(yǎng)皿/瓶中，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)，放入細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

5、24h 后觀察細胞狀態(tài)，并更換新鮮細胞培養(yǎng)液。

注意事項

1、 使用本產(chǎn)品加入細胞后，應盡量減少室溫存放時間，并盡快移至-80℃保存。

2、 對于干細胞（ES細胞）、原代等細胞凍存時，建議使用前，先對所要凍存的細胞進行至少1周以上的試驗性凍存培養(yǎng)，確認效果后再正式大批量凍存。

3、 本品含有10%DMSO，部分對DMSO敏感的細胞，建議也許*行預實驗，確認效果后再大量正式使用。

4、 對于沒有保種的新的細胞類型，使用本品時建議凍存部分細胞于含血清的凍存液中，以避免可能的意外情況。

5、 取用凍存液均要在超凈工作臺內(nèi)無菌操作 。

6、本產(chǎn)品可用于科學研究，尚未經(jīng)過臨床驗證，不可用于 用途。

7、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

基本信息

中文別名

無血清細胞凍存液；無血清細胞保存液

PH值

7.2~7.8

儲存/保存方法

2-8°C保存，有效期24個月。

實驗結果圖

無血清細胞凍存液相對傳統(tǒng)凍存液提高了細胞存活率，復蘇后活率在90%以上。