2024年6月,《Synthetic and Systems Biotechnology》上發(fā)表論文:
“Identification of a human type XVII collagen fragment with high capacity for maintaining skin health"
“具有高維持皮膚健康能力的人XVII型膠原蛋白片段的鑒定"
摘要:
膠原XVII (COL17)是一種介導(dǎo)皮膚穩(wěn)態(tài)的跨膜蛋白。由于全長膠原蛋白在微生物中難以實現(xiàn)表達(dá),因此需要選擇具有所需功能的膠原片段進(jìn)行微生物生物合成。提取COL17片段(27-33個氨基酸),復(fù)制16次,在大腸桿菌中進(jìn)行重組表達(dá)。5個變異均可溶表達(dá),最高產(chǎn)量為223 mg/L。去除融合標(biāo)簽進(jìn)行生化和生物物理表征。圓二色性結(jié)果表明,在>37°C時具有三螺旋結(jié)構(gòu)的一個變體(樣品-1707)。樣品-1707可以組裝成納米纖維(寬度,5.6 nm),并在3mg /mL時形成水凝膠。樣本-1707可誘導(dǎo)血液凝固,促進(jìn)成骨細(xì)胞分化。此外,樣品-1707具有誘導(dǎo)小鼠毛囊干細(xì)胞分化和成骨細(xì)胞遷移的高能力,具有誘導(dǎo)皮膚細(xì)胞再生和促進(jìn)傷口愈合的高能力。殼聚糖與樣品-1707復(fù)配制備了一種強水凝膠,其溶脹率比單純使用殼聚糖高30%以上。用5-L生物反應(yīng)器對樣品-1707進(jìn)行補料分批發(fā)酵,產(chǎn)率為600 mg/L。這些結(jié)果支持了樣品-1707作為皮膚護(hù)理行業(yè)使用的生物材料的大規(guī)模生產(chǎn)。
在該研究中,對L929成纖維細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞和小鼠毛囊干細(xì)胞HFSCs的體外培養(yǎng),均用到了Ausbian進(jìn)口胎牛血清。
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