最終分化的細(xì)胞可以通過譜系重編程產(chǎn)生,然而,譜系重編程受到原始細(xì)胞身份和部分功能殘留的轉(zhuǎn)化的阻礙。
2019年,發(fā)布在《Cell Resarch》上,標(biāo)題為:“A two-step lineage reprogramming strategy to generate functionally competent human hepatocytes from fibroblasts"的文章,通過模擬自然再生途徑展示了一種新的重編程策略,該策略允許生成可擴(kuò)展的肝祖細(xì)胞和具有功能能力的人肝細(xì)胞。
成纖維細(xì)胞被誘導(dǎo)為人肝祖細(xì)胞樣細(xì)胞(hhplc),該細(xì)胞能在體外穩(wěn)定擴(kuò)增并在體內(nèi)高效移植。此外,hhplc可以在體外有效地誘導(dǎo)成成熟的人肝細(xì)胞(hiHeps),其分子特征與原代人肝細(xì)胞(PHHs)高度相似。最重要的是,hiHeps可以大量生成,并且在功能上能夠取代PHHs進(jìn)行藥物代謝估計(jì)、毒性預(yù)測和乙型肝炎病毒感染建模。該項(xiàng)研究結(jié)果強(qiáng)調(diào)了祖細(xì)胞階段對(duì)成功的譜系重編程的優(yōu)勢。這一策略有望通過譜系重編程產(chǎn)生其他成熟的人類細(xì)胞類型。
本實(shí)驗(yàn)中,對(duì)人胚胎皮膚的處理,用鑷子將人胚胎皮膚組織切碎,在1 mg/mL膠原酶IV (Gibco)中37℃孵育1 - 2小時(shí)。酶處理后,離心收集細(xì)胞,用HEF培養(yǎng)基(含10%胎牛血清(FBS, Ausbian)、1%谷氨酰胺(Gibco)、1%非必需氨基酸(NEAA, Gibco)和1%青霉素/鏈霉素(PS, Gibco)的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM, Gibco)重懸。將細(xì)胞置于10 cm的組織培養(yǎng)皿中,用HEF培養(yǎng)基培養(yǎng)。
Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低,通過各種質(zhì)量檢測與無菌檢測。新批次在試用前,提供試用服務(wù),養(yǎng)細(xì)胞更放心。
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