詳細(xì)介紹
HRGEC作用原理操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱 HRGEC作用原理
種屬 人的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞
提供形式 P1-2代凍存管
安全等級(jí) 2
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 90%RPMI-1640+10%FBS
生長條件 95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度
生長特性 貼壁
存儲(chǔ)條件 50% RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 液氮
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
HRGEC作用原理注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱: N-(γ-L-谷氨酰)-α-萘胺 N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide 含量: BR
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱: L-亮氨酰-2-萘胺鹽酸鹽 L-Leucyl-2-naphthylamide hydrochloride 含量: BR,98%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱: 芐基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯 Z-ONSu 含量: BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱: 對(duì)氨基馬尿酸鈉 Sodium 4-aminohippurate 含量: BR,98%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱: 3-(2-氨乙基)吲哚 Tryptamine 含量: BR,98%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱: 對(duì)羥基苯乙胺鹽酸鹽 Tyramine hydrochloride 含量: BR,98%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱: 亞氨二醋酸/N-(羧甲基)甘氨酸 IDA 含量: BR,98%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱: 甘氨酰-脯氨酰-對(duì)硝基苯胺對(duì)甲苯磺酸鹽 GPDA 含量: BR,99%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱: 五肽促胃液素 Pentagastrin 含量: BR,98%