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          上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>質(zhì)粒>>pHyVec4

          pHyVec4

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          • pHyVec4

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2019-10-28 11:49:15瀏覽次數(shù):530

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          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          pHyVec4質(zhì)粒是使用廣泛的基因操作工具,可以進(jìn)行編碼基因、microRNA、lncRNA的功能研究、啟動(dòng)子活性、轉(zhuǎn)錄因子及3’UTR調(diào)控研究等。

          詳細(xì)介紹

          質(zhì)粒名稱:pHyVec4

          質(zhì)粒規(guī)格:2ug

           

          實(shí)驗(yàn)步驟:

          1)質(zhì)粒提取

          1.10,0001min離心收集1.5-5ml菌液沉淀于1.5ml離心管中

          2.加入100溶液1,振蕩至*懸浮

          3.加入200溶液2,立即輕柔顛側(cè)離心管6次,使菌體充分裂解,隨后將離心管冰上放置

          3分鐘

          4.加入150山溶液3,立即溫和顛倒離心管數(shù)次,冰上放置3分鐘,10,00g離心10mins

          5.將步驟4的上清轉(zhuǎn)移至新的離心管(盡量去除雜質(zhì)),加入等體積的苯酚/氖仿/異成醇混

          合均勻10,000離心5min

          將步驟5的上清轉(zhuǎn)移至新的離心管,加入2倍體積的無水乙醇,室溫放置5-1omin,沉

          降DNA

          7.10000g離心10分鐘,棄乙醇,保留沉淀,加入1ml706的乙醇洗滌沉淀,10,000離

          心5分鐘

          8.倒掉乙醇溶液,用吸水紙吸凈管壁上的水珠,室溫蒸發(fā)痕量乙醇

          9.加入適量含 Rnase的TE或滅菌雙蒸水溶解質(zhì)粒DNA

          2)質(zhì)粒鑒定瓊脂糖礙膠電泳

          灌膠:膠中加入芡光染料< SYBR Green)

          加樣:質(zhì)粒+上樣緩沖液→混勻

          電泳

          結(jié)果觀察:UV燈下

           

          pHyVec4實(shí)驗(yàn)分析:

          裂解細(xì)胞中除含有質(zhì)粒DNA外,還含有基因組DNA、各種RNA、蛋白質(zhì)和脂類等物質(zhì),因

          用堿裂解法除去雜質(zhì)

          1、防止DNA裂解: Solution1

          1)、所含糖增加溶洨黏度,維持滲透壓,防止DNA受機(jī)械剪切作用降解

          2)、所含EDTA抑制酶活性

           

          100442-200301 奧拉米特 UV法溶出度檢查 100mg

          100443-200701 富馬酸異丙吡侖 HPLC法含量測定 100mg

          100444-200401 對(duì)羥基苯甲酸丙酯 檢查用 100mg

          100445-200701 β-胡蘿卜素 含量測定 100mg 

          100446-200501 貝美格 含量測定 100mg

          100447-200701 丹皮酚磺酸鈉 含量測定 100mg

          100448-200801 地喹氯銨 HPLC法含量測定 100mg

          100452-200301 羅通定 HPLC法含量測定 50mg

          100454-200501 苯佐卡因 含量測定 100mg

          100455-200401 度米芬 HPLC法含量測定 100mg

          100456-200301 鹽酸丁卡因 HPLC法含量測定 50mg

          100457-200401 硫必利雜質(zhì)A(2-甲氧基-5-甲磺?;郊姿幔?檢查 50mg

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