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          腸堿性磷酸酶(ALPI)重組蛋白

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          更新時間:2023-03-21 19:06:16瀏覽次數(shù):218

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Alkaline Phosphatase, Intestinal (ALPI
          物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          腸堿性磷酸酶(ALPI)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:病毒PCR檢測試劑盒病毒基因分型PCR檢測試劑盒病毒通用型(AIV-U)核suan檢測試劑盒通用/H5亞型(AIV-U/AIV-H5)核suan檢測試劑盒病毒PCR檢測試劑盒傳染性膿皰皮炎病毒PCR檢測試劑盒價格短古柏線蟲PCR檢測試劑盒節(jié)狀古柏線蟲PCR檢測試劑盒

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱:腸堿性磷酸酶(ALPI)重組蛋白   

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          英文名稱:Recombinant Alkaline Phosphatase, Intestinal (ALPI)

          CIP; IAP; Calf Intestinal Alkaline Phosphatase

          酶與激酶

          代謝通路

          胃腸病學(xué)

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

          預(yù)測分子量:38.1kDa

          實際分子量:40kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:Val20~Arg333 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點:8.0

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

          特點:

          標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

          酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。

          熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

          相關(guān)產(chǎn)品:
          Recombinant Human S1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human MT2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Pig IL-8宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Pig

          Recombinant Human CNPY3宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          圖片6.png


          標(biāo)簽選擇:

          親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

          b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

          c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

          d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

          e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

          f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

          g.      大量表達(dá)

          h.      親和純化

          i.        檢測和鑒定

          原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

          e.      蛋白表達(dá)小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

          GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測

            誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

          Nucleophosmin產(chǎn)品名稱: 核仁磷suan蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

          Phospho-PLC beta3 (Ser1105)產(chǎn)品名稱: 磷酯meiCβ3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

          GABRA2產(chǎn)品名稱: GA型受體α2/GABAA Rα2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

          DRD1產(chǎn)品名稱: 多巴胺受體D1抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat

          Collagen III產(chǎn)品名稱: Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白/III型膠原抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit

          應(yīng)用類型: Other英文名稱: BAP31標(biāo)記: Unconjugated

          應(yīng)用類型: Other英文名稱: alpha Actinin 4英文別名: actinin 4;

          CEP135產(chǎn)品名稱: 中心體蛋白135抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Sheep

          phospho-BRAF (Thr598 + Ser601)產(chǎn)品名稱: B-Raf抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
          腸堿性磷酸酶(ALPI)重組蛋白人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒ANNA-1/Hu抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體elisa檢測試劑盒Human neuronal nuclear autoantibody,ANNA-1/Hu ELISA Kit

          人抗抗體(GM1)ELISA試劑盒GM1抗抗體elisa kitHuman anti-ganglioside antibody,GM1 ELISA Kit

          人抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維suan性蛋白(GFAP)自身抗體ELISA試劑盒GFAP抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維suan性蛋白ELISA試劑盒Human GFAP autoantibody ELISA Kit

          人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA試劑盒BPI-Ab抗殺菌通透性增高蛋白抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-Bactericidal permeability increasing protein antibody,BPI-Ab ELISA Kit

          人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA試劑盒anti-parotid duct Ab抗腮腺管抗體elisa檢測試劑盒Human anti-parotid duct antibody ELISA Kit
          操作步驟

          根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

          b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

          c)對于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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