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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant Adenylate Cyclase 9 (ADCY9) |
| 種屬 | Homo sapiens (Human，人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng)：腺苷酸環(huán)化酶9(ADCY9)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱(chēng)：Recombinant Adenylate Cyclase 9 (ADCY9)
AC9; ATP pyrophosphate-lyase 9; Adenylate cyclase type IX
酶與激酶
代謝通路
物種：Homo sapiens (Human，人) 來(lái)源：原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜 預(yù)測(cè)分子量：32.5kDa 實(shí)際分子量：30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽：Asp1029~Val1282 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點(diǎn)：6.0 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
特點(diǎn)：
標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時(shí)可見(jiàn)、敏感性高。
熒光標(biāo)記：熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
相關(guān)產(chǎn)品：
Recombinant Human PSMD3宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human MOG宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human CHMP1B宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human MAPK7宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
標(biāo)簽選擇：
親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類(lèi)：一類(lèi)是短肽類(lèi)標(biāo)簽；一類(lèi)是長(zhǎng)肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試，條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶，蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。
h. 鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白；表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后，表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。
C20orf151產(chǎn)品名稱(chēng): 20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框151抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Sheep
Factor alpha XIIa產(chǎn)品名稱(chēng): 凝固第XII因子/抗友因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
GCAP2產(chǎn)品名稱(chēng): 鳥(niǎo)苷suan環(huán)化mei激活蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
KCNK4產(chǎn)品名稱(chēng): 鉀離子通道蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
5HT7 Receptor產(chǎn)品名稱(chēng): 5-羥色胺受體7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
NUFIP2產(chǎn)品名稱(chēng): NUFIP2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit
ZSWIM6產(chǎn)品名稱(chēng): ZSWIM6蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
OR52K2產(chǎn)品名稱(chēng): 嗅覺(jué)受體52K2抗體交叉反應(yīng): Human
RNF187產(chǎn)品名稱(chēng): 環(huán)指蛋白187抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit
TRGC2產(chǎn)品名稱(chēng): T細(xì)胞受體γ抗體交叉反應(yīng): Human
腺苷酸環(huán)化酶9(ADCY9)重組蛋白人囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(CFTR)ELISA試劑盒CFTR囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator(CFTR)ELISA Kit
人囊泡乙酰轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(VAChT)ELISA試劑盒VAChT囊泡乙酰轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Human Vesicular Acetylcholine Transporter(VAChT)ELISA Kit
人囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(VMAT2)ELISA試劑盒VMAT2囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2elisa kitHuman Vesicular Monoamine Transporter 2(VMAT2)ELISA Kit
人耐氧化性能蛋白1(OXR1)ELISA試劑盒OXR1耐氧化性能蛋白1ELISA試劑盒Human Oxidation Resistance 1(OXR1)ELISA Kit
人耐扭蛋白3A(TOR3A)ELISA試劑盒TOR3A耐扭蛋白3Aelisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Torsin 3A(TOR3A)ELISA Kit
操作步驟 ：
根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。
1、樣品前處理：
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管，然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
2、后處理：
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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