詳細介紹
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:小亞基鈣蛋白酶1(CAPNS1)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Calpain, Small Subunit 1 (CAPNS1)
CANP; 30K; Calpain 4; CANPS; CAPN4; CDPS; Calcium-activated neutral proteinase small subunit; Calcium-dependent protease small subunit; Calpain regulatory subunit
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::n/a 預測分子量:58.3kDa 實際分子量:-(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Met1~Ser268 with N-terminal His and GST Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:>90% 等電點:- 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human ATG4D宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human DHRS3宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human EIF1B宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human CD80宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測
誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標記:標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標記方法。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。
CGREF1產(chǎn)品名稱: 細胞生長調(diào)節(jié)蛋白CGREF1抗體交叉反應: Human
phospho-BRAF (Ser444)產(chǎn)品名稱: B-Raf抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit
FOLR2產(chǎn)品名稱: 胎盤葉suan受體蛋白2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse
LPA1產(chǎn)品名稱: 溶磷脂suan受體蛋白1/EDG2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
應用類型: Other英文名稱: CYP26A1英文別名: CP26; CP26A_HUMAN; CYP26; CYP26A 1; cyp26a1; GRP產(chǎn)品名稱: 促胃泌su釋放肽抗體交叉反應: Mouse, Rat
CD42b交叉反應: ATRX產(chǎn)品名稱: ATP依賴性解旋meiATRX抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
PAK3產(chǎn)品名稱: p21激活激mei3抗體交叉反應: Human, Mouse, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit
ROGDI產(chǎn)品名稱: 亮氨suan拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白ROGDI抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep
小亞基鈣蛋白酶1(CAPNS1)重組蛋白人磷suan絲氨suan轉(zhuǎn)氨mei1(PSAT1)ELISA試劑盒PSAT1磷suan絲氨suan轉(zhuǎn)氨mei1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Phosphoserine Aminotransferase 1(PSAT1)ELISA Kit
人磷suan絲氨suan性磷suanmei(PSPH)ELISA試劑盒PSPH磷suan絲氨suan性磷suanmeielisa檢測試劑盒Human Phosphoserine Phosphatase(PSPH)ELISA Kit
人磷suan神經(jīng)膜蛋白(PLM)ELISA試劑盒PLM磷suan神經(jīng)膜蛋白elisa kitHuman Phospholemman(PLM)ELISA Kit
人磷suan葡萄糖脫氫mei(PGD)ELISA試劑盒PGD磷suan葡萄糖脫氫meiELISA試劑盒Human Phosphogluconate Dehydrogenase(PGD)ELISA Kit
人磷suan甲羥戊suan激mei(PMVK)ELISA試劑盒PMVK磷suan甲羥戊suan激meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Phosphomevalonate Kinase(PMVK)ELISA Kit