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          堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-03-22 21:13:02瀏覽次數(shù):266

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Alkaline Phosphatase (ALP)
          物種 Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:酪氨suan3/色氨suan5單加氧mei活化蛋白θ(YWHAq)重組蛋白英文名稱:Recombina Tyrosine 3/Tryptophan 5 Monooxygenase Activation Protein Theta (YWHAq)弗林(FUR)重組蛋白英文名稱:Recombina Furin (FUR)非神經(jīng)元性烯醇化mei(ENO1)重組蛋白

          詳細介紹

          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白

          Recombinant Alkaline Phosphatase (ALP)

          Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)

          商品介紹:

          AKP; ALKP; Basic Phosphatase

          酶與激酶

          代謝通路

          腫瘤免疫

          感染免疫

          肝膽病學(xué)

          骨骼代謝

          物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)

          來源:原核表達

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細胞定位::細胞膜

          預(yù)測分子量:39.2kDa

          實際分子量:42kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標簽:N-terminal His Tag

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 90%

          等電點:7.3

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.   

          蛋白表達及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

          2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

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          圖片1.png


          相關(guān)產(chǎn)品:

          碳酸酐酶Ⅰ(CA1)重組蛋白Recombinant Furin (FUR)

          肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白Recombinant Glyoxalase I (GLO1)

          肽酶D(PEPD)重組蛋白Recombinant Glucocerebrosidase (GBA)

          肽基脯氨酰異構(gòu)酶F(PPIF)重組蛋白Recombinant Hyaluronan Synthase 1 (HAS1)   

          注意事項:

          1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作                                            

          操作步驟:

          Ⅰ 實體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個

          0.5 mL~1 mL

          5×106個

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          MCP4產(chǎn)品名稱: 單核細胞趨化蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit

          FRYL產(chǎn)品名稱: FRYL蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep

          SOSSC產(chǎn)品名稱: 單鏈DNA結(jié)合蛋白相互作用蛋白1交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit

          Calsequestrin產(chǎn)品名稱: 肌鈣集蛋白/收鈣su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit

          human CD8/PE-Cy7產(chǎn)品名稱: PE-Cy7標記小鼠抗人CD8單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

          PADI4產(chǎn)品名稱: 相關(guān)基因抗體交叉反應(yīng): Human

          HSBP1產(chǎn)品名稱: 熱休克因子結(jié)合蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Bee

          Desmocollin 2 + 3產(chǎn)品名稱: 橋粒糖蛋白2/橋粒糖蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse

          Slc26a5產(chǎn)品名稱: 感覺神經(jīng)性常染色體隱性遺傳61抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit

          Gas1產(chǎn)品名稱: 生長休止特定蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep   

          堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白小鼠神經(jīng)細胞粘附分子1(NCAM1)ELISA試劑盒NCAM1神經(jīng)細胞粘附分子1ELISA試劑盒Mouse Neural cell adhesion molecule 1,NCAM1 ELISA kit

          小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒OMgp-Ab少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Mouse anti-oligodendrocyte-myelin glycoprotein antibody,OMgp-Ab ELISA Kit

          小鼠趨化因子配體1(CCL1)ELISA試劑盒CCL1趨化因子配體1elisa kitMouse chemokine (C-C motif) ligand 1 ELISA Kit

          小鼠趨化因子5(CCL5/RANTES)ELISA試劑盒CCL5/RANTES趨化因子5ELISA試劑盒Mouse CCL5/RANTES ELISA Kit

          小鼠葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)ELISA試劑盒GRP78葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78elisa檢測試劑盒Mouse Glucose Regulated Protein 78,GRP78 Elisa kit 


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