產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Granzyme M (GZMM) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-22 22:18:49瀏覽次數(shù):434
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Granzyme M (GZMM) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
顆粒酶M(GZMM)活性蛋白 | Active Granzyme M (GZMM) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
GZM-M; LMET1; MET1; Hu-Met-1; Met-ase; Lymphocyte Met Ase 1; Met-1 serine protease; Natural killer cell granular protease 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:10.3 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
精脒/精胺N1-乙?;D(zhuǎn)移酶1(SAT1)重組蛋白Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 3 (LOXL3)
精胺氧化酶(SMOX)重組蛋白Recombinant Hydroxyacid Oxidase 1 (HAO1)
精胺合酶(SMS)重組蛋白Recombinant TTK Protein Kinase (TTK)
精氨酰氨基肽酶(RNPEP)重組蛋白Recombinant Salt Inducible Kinase 2 (SIK2)
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Thrombin Activation peptide fragment 1產(chǎn)品名稱: 凝mei(凝因子II)激活肽1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, GuineaPig
SMAD5產(chǎn)品名稱: 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig
C1ORF111產(chǎn)品名稱: 1號染色體開放閱讀框111抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
HMG4/HMGB3產(chǎn)品名稱: 高遷移率家族蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
Cathepsin S產(chǎn)品名稱: 組織蛋白meiS抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit
sLOX 1產(chǎn)品名稱: 可溶性凝集su樣氧化受體1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
Phospho-Mcl1 (Ser159 + Thr163)產(chǎn)品名稱: 髓樣細胞白-1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
IGFL1產(chǎn)品名稱: 胰島su生長因子樣家族成員1抗體交叉反應(yīng): Human
SNTB2/Syntrophin-3產(chǎn)品名稱: 互養(yǎng)蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
NDRG3產(chǎn)品名稱: 抑基因NDRG3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
顆粒酶M(GZMM)活性蛋白大鼠激肽原(KNG)ELISA試劑盒KNG激肽原elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat kininogen,KNG ELISA Kit
大鼠基質(zhì)金屬蛋白mei14(MMP-14)ELISA試劑盒MMP-14基質(zhì)金屬蛋白mei14elisa檢測試劑盒Rat Matrix Metalloproteinase 14,MMP-14 ELISA Kit
大鼠肌質(zhì)網(wǎng)膜鈣ATPmei(SERCA)ELISA試劑盒SERCA肌質(zhì)網(wǎng)膜鈣ATPmeielisa kitRat Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3 ELISA Kit
大鼠活性氧調(diào)制因子1(ROMO1)ELISA試劑盒ROMO1活性氧調(diào)制因子1ELISA試劑盒Rat Reactive oxygen species modulator 1,ROMO1 ELISA kit
大鼠活化suA受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)ELISA試劑盒ACV-RAb IgM活化suA受體抗體IgMelisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat anti-Activin A receptor antibody IgM,ACV-RAb IgM ELISA Kit