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          DNA指導聚合酶β(POLb)重組蛋白

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          更新時間:2023-03-22 13:38:10瀏覽次數(shù):279

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

          產品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 化工,生物產業(yè)
          主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant Polymerase DNA Directed Beta (POLb)
          種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          DNA指導聚合酶β(POLb)重組蛋白公司正在出售的產品:卡他莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒綿羊莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒莫拉氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒毛霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒堪薩斯分枝桿菌PCR檢測試劑盒

          詳細介紹

          圖片6.png


          公司產品僅供科研實驗產品屬性:

          產品名稱:DNA指導聚合酶β(POLb)重組蛋白   

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          英文名稱:Recombinant Polymerase DNA Directed Beta (POLb)

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達

          宿主E.coli

          內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細胞定位::n/a

          預測分子量:-

          實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)

          片段與標簽:N-terminal His Tag

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點:-

          應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

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          單酰甘油脂肪酶(MGL)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipase, Monoacylglycerol (MGL)Homo sapiens (Human,人)

          膽綠素還原酶A(BLVRA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Biliverdin Reductase A (BLVRA)Homo sapiens (Human,人)

          膽綠素還原酶B(BLVRB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Biliverdin Reductase B (BLVRB)Homo sapiens (Human,人)

          膽鹽依賴性脂肪酶(BSDL)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipase, Bile Salt Dependent (BSDL)Homo sapiens (Human,人)

          標簽選擇:

          親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)

          b.      表達載體的構建

          c.      無內毒素的質粒抽提

          d.      細胞瞬時轉染

          e.      表達小試,條件優(yōu)化

          f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

          g.      大量表達

          h.      親和純化

          i.        檢測和鑒定

          原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉化表達菌株

          e.      蛋白表達小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

          GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

            誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

          操作步驟

          根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

          b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

          c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

          特點:

          標記:標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結合是一種非常簡便、直接的標記方法。

          酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,結果即時可見、敏感性高。

          熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經恰當?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。

          SLIRP/C14orf156產品名稱: 14號染色體開放閱讀框156抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit

          IMPG1產品名稱: IMPG1蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

          FBF-1產品名稱: FBF-1蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

          GALP產品名稱: 神經甘丙肽樣肽GALP抗體交叉反應: Human

          phospho-NIFK (Thr234)產品名稱: NIFK抗體交叉反應: Human, Mouse, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          APXL產品名稱: APXL蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

          CRY2產品名稱: 隱色su-2單克隆抗體交叉反應: Human, Mouse

          phospho-FAK (Ser910)產品名稱: 粘著斑激mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken

          IL-4產品名稱: 白介su4抗體交叉反應: Human

          Nicastrin產品名稱: 蛋白APH2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse
          DNA指導聚合酶β(POLb)重組蛋白人核基質蛋白4(NMP4)ELISA試劑盒NMP4核基質蛋白4ELISA試劑盒Human Nuclear Matrix Protein 4(NMP4)ELISA Kit

          人核黃su轉運蛋白2(RFT2)ELISA試劑盒RFT2核黃su轉運蛋白2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Riboflavin Transporter 2(RFT2)ELISA Kit

          人核苷磷suan化mei(NP)ELISA試劑盒NP核苷磷suan化meielisa檢測試劑盒Human Nucleoside Phosphorylase(NP)ELISA Kit

          人合子阻滯基因1(ZAR1)ELISA試劑盒ZAR1合子阻滯基因1elisa kitHuman Zygote Arrest 1(ZAR1)ELISA Kit

          人汗suanmeiαL(IDUα)ELISA試劑盒IDUα汗suanmeiαLELISA試劑盒Human Iduronidase Alpha L(IDUa)ELISA Kit


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