堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。

產(chǎn)品名稱(chēng)：堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

拉丁屬名 ： Bacillus

種名加詞 ： firmus Bredemann and Werner

模式菌株 ： 非模式菌株

主要用途 ： 研究；教學(xué)

具體用途 ：

特征特性 ： 形態(tài)類(lèi)似于枯草芽孢桿菌，從葡萄糖氧化產(chǎn)酸，對(duì)酸敏感，只能在pH6以上生長(zhǎng)，在能支持生長(zhǎng)的培養(yǎng)基上加入葡萄糖可抑制其早期生長(zhǎng)，而pH值并沒(méi)有降到6以下。低營(yíng)養(yǎng)要求是氨基酸和VH或VH和硫氨素的混合物。
公司專(zhuān)業(yè)代理ATCC菌種，*，質(zhì)量保證，產(chǎn)品僅用于科研為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。
儀器設(shè)備與器具：
1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平：感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
低溫存法：
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長(zhǎng)期保存。?

綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測(cè)；
（6）取液儲(chǔ)存；通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
保藏方法：
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細(xì)菌用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
產(chǎn)品僅用于科研先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類(lèi)、甘油、二甲亞砜等。
使用說(shuō)明書(shū)：
復(fù)蘇菌種前需先準(zhǔn)備好適用于該菌生長(zhǎng)的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備，以形成無(wú)菌的操作環(huán)境。
開(kāi)啟之前，先用75%酒精棉消毒試管表面，按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)瓶蓋和膠塞，加入0.3ml左右的配套液體培養(yǎng)基，用無(wú)菌滴管反復(fù)吹吸，將凍干菌種溶解為懸液，然后用無(wú)菌滴管或接種環(huán)移至斜面、平板或液體培養(yǎng)基，并連同剩余菌懸液的試管一起放置于36℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
次日觀察菌種的生長(zhǎng)情況，如未生長(zhǎng)，應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)24h，或吸取培養(yǎng)之后的試管剩余菌懸液再次接種培養(yǎng)，培養(yǎng)24小時(shí)觀察。
菌株為一次性使用品，暫不開(kāi)啟的菌種應(yīng)在4℃環(huán)境下保存。
復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代以后使用，建議菌種使用5代后棄用。
R-G細(xì)胞活力和凋亡檢測(cè)ADAMTS7 peptide  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗原C34H44O19

BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖流式細(xì)胞儀檢測(cè)AT (Angiotenogen)  血管緊張素原（抗原）C27H30O16

BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖熒光顯微鏡檢測(cè)5-LOX (5-lipoxygenase)  5-脂氧合酶抗原C52H86O21

乳酸脫氫酶（LDH）釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)ADAMTS7 peptide/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗原C15H12O6

酸性磷酸酶（AP）活力法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)Apo-E (Apolipoprotein E)  載脂蛋白E（抗原）C35H49NO9

葡萄糖耗損法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)reMOG 1-125 protein  重組髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白1-125C32H46O16

紅色熒光細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)IKI3 family protein  C41H64O13

磺酰羅丹明B（Sulforhodamine B）細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)ILK-1 (Integrin-linked protein kinase 1)  整合素連接激酶-1C29H34O15

考馬斯亮藍(lán)細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)Aromatase  芳香化酶（抗原）C20H20O4

XTT比色法細(xì)胞繁殖測(cè)定SP-C peptide  肺表面活性蛋白C抗原C19H21NO2

CCK-1(水溶性四氮唑－1 )比色法細(xì)胞繁殖測(cè)定Mast Cell Chymase  肥大細(xì)胞類(lèi)糜蛋白酶1C16H12O5

CCK-8(水溶性四氮唑－8) 比色法細(xì)胞繁殖測(cè)定Ceruloplasmin peptide  銅藍(lán)蛋白抗原C21H21O11

酚藏花紅（PHENOSAFRANINE）植物細(xì)胞繁殖測(cè)定CKLF1  趨化素樣蛋白C15H11O6Cl

二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate）植物細(xì)胞繁殖測(cè)定ART(Artemin)(抗原)  C21H26O10

伊文思藍(lán)（EVANS BLUE）植物細(xì)胞繁殖測(cè)定AATK peptide  細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪氨酸激酶抗原C28H32O16

蟲(chóng)卵細(xì)胞活力和死亡熒光定量檢測(cè)AQP-2 (aquaporin Protein-2)  水通道蛋白-2（抗原）C16H18O10
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌人肺成纖維細(xì)胞 Fibrinogen (FG)

人支氣管平滑肌細(xì)胞 Fibrinogen (FG)

人氣管平滑肌細(xì)胞 Somatostatin (SST)

人支氣管成纖維細(xì)胞 Somatostatin (SST)

人骨骼肌細(xì)胞 Somatostatin (SST)

人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞 Beta-Endorphin (bEP)

人骨骼肌成肌細(xì)胞 Motilin (MTL)

人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 Motilin (MTL)

人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP)