前列腺正常細(xì)胞;RWPE-2公司正在銷售的產(chǎn)品：內(nèi)皮和平滑肌衍生的神經(jīng)纖毛蛋白抗體Anti-CCL17/TARC/FITC 熒光素標(biāo)記胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體IgG
含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族2抗體Anti-ABCD1/MDC(small inducible cytokine A22 precursor)/FITC 熒光素標(biāo)記抗嗜酸粒趨化蛋白2抗體IgG
DNA連接酶1抗體An

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：前列腺正常細(xì)胞;RWPE-2

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9939

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

V5 tag/FITC 熒光素標(biāo)記V5 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CD36 CD36(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

粘膜相關(guān)上皮趨化因子MEC抗體  CCL28 0.1ml

Phospho-SHP2 (Tyr584) 英文名稱： 磷酸化蛋白酪酸磷酸酶2抗體 0.1ml

Phospho-eIF2 alpha(Ser51) 英文名稱： 磷酸化真核啟動(dòng)因子2α抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HER2 (Tyr686) 磷酸化HER2受體抗體 規(guī)格 0.1ml

CD36 CD36(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

P-selectin 人可溶性P-選擇素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CTGF 結(jié)締組織生長(zhǎng)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NIPAL2 NIPAL2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Human omentin ELISA Kit 人網(wǎng)膜素 96T

TAP2 英文名稱： ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子2抗體 0.2ml

CENPI 英文名稱： 著絲粒蛋白I抗體 0.1ml

 CTGF 結(jié)締組織生長(zhǎng)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  human IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml

FBXL16 英文名稱： FBXL16蛋白抗體 0.2ml

轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體  E2F1 0.1ml

 Phospho-PDGF Receptor alpha(Tyr849)/PDGF Receptor beta (Tyr857)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α/β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-TNIK(Ser764) 磷酸化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  chi IgM/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗雞IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
前列腺正常細(xì)胞;RWPE-2細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次大鼠可溶性血管粘附分子1（sVCAM-1）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次大鼠球蛋白A（IgA）ELISA試劑盒,

凍切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次大鼠氧化低密度脂蛋白（OxLDL）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白（β-TG）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次豬B瘤因子2（Bcl-2）ELISA試劑盒,

凍切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次駱駝脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PL-A2）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次山羊腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA試劑盒,

細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50 次兔子組（HIS）ELISA試劑盒,

細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒10/50 次兔子間粘附分子3（ICAM-3/CD50）ELISA試劑盒,

CASPASE-10蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次神經(jīng)保護(hù)因子（CVNPF）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

CASPASE-10蛋白共沉淀分析試劑盒5次臘樣芽胞桿菌選擇瓊脂基礎(chǔ)用于臘樣芽胞桿菌選擇性分離培養(yǎng)

CASPASE-10蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25次貝母素乙 Peiminine

細(xì)胞MYC蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次L-天冬二甲酯鹽酸鹽

載玻片細(xì)胞MYC蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次L-精甲酯

凍切片組織MYC蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次Fmoc-D-天冬酰