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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗 | 英文名稱 | Recombinant Dual Specificity Phosphatase 1 (DUSP1) |
| 物種 | Homo sapiens (Human，人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
雙特異性磷酸酶1(DUSP1)重組蛋白 | Recombinant Dual Specificity Phosphatase 1 (DUSP1) | Homo sapiens (Human，人) |
商品介紹：
CL100; HVH1; MKP1; PTPN10; Mitogen-activated protein kinase phosphatase 1; Protein-tyrosine phosphatase CL100; Dual specificity protein phosphatase hVH1 酶與激酶 物種：Homo sapiens (Human，人) 來源：原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞核 預(yù)測分子量：51.0kDa 實(shí)際分子量：51kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽：Val175~Cys367 with N-terminal His and GST Tag 緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 80% 等電點(diǎn)：6.9 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品：
Recombinant Human COX4NB宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human KIF3A宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
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Recombinant Human NXN宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
操作步驟：
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
注意事項：
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作
phospho-Bid (Ser61)產(chǎn)品名稱: BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse
phospho-MAK (Tyr159)產(chǎn)品名稱: 絲氨suan/蘇氨suan蛋白激meiMAK抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
應(yīng)用類型: Other英文名稱: Neuropilin-1英文別名: Neuropilin-1; NRP-1; Neuropilin1; BDCA4; CD 304; CD304; DKFZp686A03134; DKFZp781F1414; NEL like protein 1; Nel related protein 1; Neuropilin1; Neuropilin 1; Neuropilin1 transmembrane receptor; NP1; NRP 1; NRP; NRP1; OTTHUMP00000020818; OTTHUMP00000020820; OTTHUMP00000020821; Vascular endothelial cell growth factor 165 receptor; VEGF165R; A5 protein; BLOOD DENDRITIC CELL ANTIGEN 4; NRP1_HUMAN.
phospho-MCK10 (Tyr513)產(chǎn)品名稱: 上皮盤狀結(jié)構(gòu)域受體1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse
應(yīng)用類型: Other英文名稱: LYPD3英文別名: C4.4A;
Tyrosine Hydroxylase產(chǎn)品名稱: Tyrosine Hydroxylase交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
Alpha-synuclein (nitro-Tyr39)產(chǎn)品名稱: 硝基化α-突觸核蛋白/n-syn抗體產(chǎn)品別名: α Synuclein; α-Synuclein; nitrated α-synuclein; n-syn.
Acetyl-Histone H4 (Lys16)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Rabbit
RBM20產(chǎn)品名稱: RNA結(jié)合蛋白20抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
CCDC102B產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白102B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
雙特異性磷酸酶1(DUSP1)重組蛋白人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒BAFF-RB細(xì)胞活化因子受體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor,BAFF-R ELISA Kit
人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒BCDFB細(xì)胞分化因子elisa檢測試劑盒Human B cell differetiation factor，BCDF ELISA Kit
人B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子ε(NFKBIE)ELISA試劑盒NFKBIEB細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子εelisa kitHuman NFKBIE ELISA Kit
人B群鏈球菌多糖抗體(IgG)ELISA試劑盒IgGB群鏈球菌多糖抗體ELISA試劑盒Human Anti-Group B Streptococcal Type III Capsular Antibody IgG ELISA Kit
人B淋巴細(xì)胞抗原(CD20)ELISA試劑盒CD20B淋巴細(xì)胞抗原elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human CD20 ELISA Kit
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