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          蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白

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          更新時間:2023-03-21 19:03:50瀏覽次數(shù):243

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)
          物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷mei(NAGLU)重組蛋白英文名稱:Recombina N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase (NAGLU)過氧化還原mei1(PRDX1)重組蛋白英文名稱:Recombina Peroxiredoxin 1 (PRDX1)組織A(CTSA)重組蛋白英文名稱:Recombina Cathepsi

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白

          Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)

          Homo sapiens (Human,人)

          商品介紹:

          P4HB; ERBA2L; PDIA1; PO4DB; PROHB, DSI, GIT, PDI, PO4HB, P4Hbeta; Prolyl 4-Hydroxylase Subunit Beta; Procollagen-Proline 2-Oxoglutarate 4-Dioxygenase Beta Polypeptide

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔

          預(yù)測分子量:58.8kDa

          實際分子量:58/55kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:Phe216~Gly465 with N-terminal His and GST Tag

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點:5.7

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

          圖片5.png

          圖片1.png


          相關(guān)產(chǎn)品:

          Recombinant Human SHP2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human CEBPA宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Pig GH宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Pig

          Recombinant Human SCG3宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

          注意事項:

          1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作                                            

          操作步驟:

          Ⅰ 實體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個

          0.5 mL~1 mL

          5×106個

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          GABRA1/GABA A Receptor alpha 1產(chǎn)品名稱: G1A型受體α1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse

          FHOD1產(chǎn)品名稱: 肢體畸形相關(guān)蛋白FHOD1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit

          LCLAT1產(chǎn)品名稱: 心磷脂酰基轉(zhuǎn)移mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          PI3 Kinase p110 delta產(chǎn)品名稱: 磷脂酰肌醇激mei催化亞單位D抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          CD74產(chǎn)品名稱: CD74抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          MMP-2產(chǎn)品名稱: 基質(zhì)金屬蛋白mei2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit

          phospho-NFKB p65 (Ser536)產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞核因子抗體產(chǎn)品別名: NFκB-p65; NFκB p65; NF κB-p65; NFκBp65;

          Arginase 1產(chǎn)品名稱: 精氨suanmei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit

          TTC8產(chǎn)品名稱: 巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白8抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          LGI3產(chǎn)品名稱: Lgi3蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep   

          蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白人抗紋狀體(ST)自身抗體ELISA試劑盒ST抗紋狀體ELISA試劑盒Human anti striatum(ST)autoantibody ELISA kit

          人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒AGPA/PCA抗胃壁細(xì)胞抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-gastric parietal cell antibody,AGPA/PCA ELISA Kit

          人抗尾狀核(CN)自身抗體ELISA試劑盒CN抗尾狀核elisa檢測試劑盒Human anti caudate nucleus(CN)autoantibody ELISA kit

          人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒ARA抗網(wǎng)硬蛋白抗體elisa kitHuman anti-Reticulin antibody,ARA ELISA Kit

          人抗外切mei體復(fù)合物成分RRP45(EXOSC9)抗體ELISA試劑盒EXOSC9抗外切mei體復(fù)合物成分RRP45ELISA試劑盒Human anti exosome complex component RRP45(EXOSC9)antibody ELISA kit 


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