產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Calpain 10 (CAPN10) |
種屬 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-22 11:45:38瀏覽次數(shù):269
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Calpain 10 (CAPN10) |
種屬 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
鈣蛋白酶10(CAPN10)重組蛋白 | Recombinant Calpain 10 (CAPN10) | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
商品介紹:
Calcium-activated neutral proteinase 10 酶與激酶 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::n/a 預(yù)測分子量:- 實際分子量:-(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:- 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human DIO2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human DDA1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human COX7A2L宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human P2RX7宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Alpha-Synuclein產(chǎn)品名稱: 核突觸蛋白α抗體產(chǎn)品別名: α Synuclein; α-Synuclein.
MRPL46產(chǎn)品名稱: 線粒體核糖體蛋白L46抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
DCDC2產(chǎn)品名稱: 雙皮層蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白DCDC2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep
NS5ATP9產(chǎn)品名稱: 丙型毒NS5A激活蛋白9抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
HERC4產(chǎn)品名稱: HERC4 E3泛su蛋白連接mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
EML2產(chǎn)品名稱: EML2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit, Sheep
RBMX2產(chǎn)品名稱: RNA結(jié)合蛋白X-連鎖蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Histone H2B (acetyl K5)產(chǎn)品名稱: 乙?;M蛋白H2B K5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow
ZFHX4產(chǎn)品名稱: 鋅指同源盒蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
MRFAP1L1產(chǎn)品名稱: T淋巴細胞活化蛋白樣蛋白MRFAP1L1抗體交叉反應(yīng): Human
鈣蛋白酶10(CAPN10)重組蛋白人磷suan甘露糖mei1(PMM1)ELISA試劑盒PMM1磷suan甘露糖mei1ELISA試劑盒Human Phosphomannomutase 1(PMM1)ELISA Kit
人磷suan泛酰半胱氨suan脫羧mei(PPCDC)ELISA試劑盒PPCDC磷suan泛酰半胱氨suan脫羧meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Phosphopantothenoylcysteine Decarboxylase(PPCDC)ELISA Kit
人磷suan泛酰半胱氨suan合成mei(PPCS)ELISA試劑盒PPCS磷suan泛酰半胱氨suan合成meielisa檢測試劑盒Human Phosphopantothenoylcysteine Synthetase(PPCS)ELISA Kit
人磷suan二酯mei9A(PDE9A)ELISA試劑盒PDE9A磷suan二酯mei9Aelisa kitHuman Phosphodiesterase 9A(PDE9A)ELISA Kit
人磷suan二酯mei8B(PDE8B)ELISA試劑盒PDE8B磷suan二酯mei8BELISA試劑盒Human Phosphodiesterase 8B(PDE8B)ELISA Kit