產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Ribonuclease A (RNase A) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-23 08:41:00瀏覽次數(shù):304
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Ribonuclease A (RNase A) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
核糖核酸酶A(RNase A)活性蛋白 | Active Ribonuclease A (RNase A) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
RNASE1; RNASE; Rnase-A; RNase UpI-1; RIB-1; Ribonuclease,RNase A Family,1(Pancreatic) 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:8.8 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
胱天蛋白酶1(CASP1)重組蛋白Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 10 (MAPK10)
胱天蛋白酶1(CASP1)活性蛋白Recombinant Homeodomain Interacting Protein Kinase 2 (HIPK2)
胱硫醚β合酶(CbS)重組蛋白Recombinant N-Acetylgalactosamine-6-Sulfatase (GALNS)
胍乙酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GAMT)重組蛋白Recombinant Palmitoyl Protein Thioesterase 1 (PPT1)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
注意事項:
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
FABP3/H-FABP產(chǎn)品名稱: 心型脂肪suan結(jié)合蛋白/脂肪suan結(jié)合蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
BMP6產(chǎn)品名稱: 骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
Di-Methyl-Histone H3 (Lys27)交叉反應(yīng): ZCCHV產(chǎn)品名稱: ZCCHV蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
WEE1產(chǎn)品名稱: WEE1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
MRPL14產(chǎn)品名稱: 線粒體核糖體蛋白L14抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
C1orf123產(chǎn)品名稱: 1號染色體開放閱讀框123抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
RASSF7產(chǎn)品名稱: RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep
Di-Methyl-Histone H3 (Lys79)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Rabbit
RSBN1L產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞堿性蛋白1樣蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse, Rabbit, Sheep
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兔乙酰化饑餓激su(aGHRL)ELISA試劑盒aGHRL兔乙?;囸I激suelisa kitRabbit acylated appetite-regulating hormone,aGHRL ELISA kit
兔乙酰酯mei(AChE)ELISA試劑盒AChE兔乙酰酯meiELISA試劑盒Rabbit Acetylcholinesterase,ACHE ELISA kit
兔乙酰受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒AChRab兔乙酰受體抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit
兔乙酰(ACh)ELISA試劑盒ACh兔乙酰elisa檢測試劑盒Rabbit acetylcholine,ACH ELISA Kit