產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-22 09:18:41瀏覽次數(shù):547
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅲ(P4Ha3)重組蛋白 | Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide III (P4Ha3) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
Procollagen-Proline,2-Oxoglutarate 4-Dioxygenase(Proline 4-Hydroxylase),Alpha Polypeptide III 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來(lái)源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::n/a 預(yù)測(cè)分子量:39.7kDa 實(shí)際分子量:40kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書) 片段與標(biāo)簽:Glu227~Asp544 with 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點(diǎn):- 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng):
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
PARP1產(chǎn)品名稱: 多苷二磷suan多聚mei抗體/多聚ADP-核糖聚合mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
MST1產(chǎn)品名稱: 蛋白激meiMST抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
TLR5產(chǎn)品名稱: Toll樣受體5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
Cytochrome C產(chǎn)品名稱: 細(xì)單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2)產(chǎn)品名稱: RNA聚合meiII CTD抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
Butyrylcholinesterase產(chǎn)品名稱: 丁酰酯mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit
SMYD1產(chǎn)品名稱: SMYD1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
phospho-IKK beta (Tyr199)產(chǎn)品名稱: KB蛋白激meiβ抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
phospho-CaMK2 alpha (Tyr230)產(chǎn)品名稱: 鈣/鈣調(diào)su依賴蛋白激mei2α抗體產(chǎn)品別名: phospho-CaMK2α (Tyr230); p-CaMK2α (Tyr230);
應(yīng)用類型: Other英文名稱: Cyclin D1英文別名: CyclinD1; Cyclin-D1; B cell ccl/lymphoma 1; B cell leukemia 1; B-cell CLL/lymphoma 1; B-cell leukemia 1; B-cell lymphoma 1 protein; BCL-1; BCL1; BCL1 oncogene; CCND 1; CCND1; CCND1 protein; CCND1/FSTL3 fusion gene, included; CCND1/IGHG1 fusion gene; CCND1/IGHG1 fusion gene, included; CCND1/IGLC1 fusion gene, included; CCND1/PTH fusion gene, included; Parathyroid adematosis 1; PRAD1; FSTL3; CCND1_HUMAN; AI327039; B cell lymphoma 1 protein; BCL 1; BCL-1; BCL-1 oncogene; BCL1 oncogene; CCND1/FSTL3 fusion gene, included; cD1; Cyl 1; D11S287E; G1/S specific cyclin D1; G1/S-specific cyclin-D1.
脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅲ(P4Ha3)重組蛋白人乙酰復(fù)合胺-O-甲基轉(zhuǎn)移mei(ASMT)ELISA試劑盒ASMT乙酰復(fù)合胺-O-甲基轉(zhuǎn)移meiELISA試劑盒Human Acetylserotonin-O-Methyltransferase(ASMT)ELISA Kit
人乙酰輔meiA乙酰轉(zhuǎn)移mei2(ACAT2)ELISA試劑盒ACAT2乙酰輔meiA乙酰轉(zhuǎn)移mei2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2(ACAT2)ELISA Kit
人乙酰輔meiA(A-CoA)ELISA試劑盒A-CoA乙酰輔meiAelisa檢測(cè)試劑盒Human Acetyl Coenzyme A(A-CoA)ELISA Kit
人乙酰酯mei關(guān)聯(lián)蛋白(ACHAP)ELISA試劑盒ACHAP乙酰酯mei關(guān)聯(lián)蛋白elisa kitHuman Acetylcholinesterase Associated Protein(ACHAP)ELISA Kit
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