詳細介紹
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
產品名稱:大鼠肺血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10111
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
cGMP ELISA Kit 大鼠環(huán)磷酸鳥苷Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
ZNF307 鋅指蛋白307抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FSTL1/FRP 卵泡相關蛋白1 規(guī)格 0.1ml
IGFBP-2(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2 96T
Neuropilin 1 英文名稱: 神經纖毛蛋白1抗體 0.1ml
APOBEC1 英文名稱: 載脂蛋白B-mRNA編輯酶復合物1抗體 0.2ml
ZNF307 鋅指蛋白307抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TGF Beta 1 大鼠轉化生長因子 β 1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
DTNB 肌Dystrobrevin β蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Natriuretic Peptide Receptor A 利鈉肽受體A抗體 規(guī)格 0.2ml
Human Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit 人過敏/補體片斷4 96T
SLCO2B1 英文名稱: 可溶性載質轉運蛋白2B1抗體 0.2ml
C22orf32 英文名稱: 22號染色體開放閱讀框32抗體 0.2ml
DTNB 肌Dystrobrevin β蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Guinea pig IgG/APC APC標記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
human Fibrinogen 英文名稱: 人纖維蛋白原單克隆抗體 0.1ml
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體 Caspase-6 0.1ml
NOS-3/eNOS /FITC 熒光素標記一氧化氮合成酶-3抗體(內皮型)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh POLA2 DNA聚合酶α2抗體 規(guī)格 0.2ml
ZNF474/FITC 熒光素標記鋅指蛋白474抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠肺血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基4%多聚甲醛固著液50毫升派洛寧Y
4%中性多聚甲醛固著液50毫升寡聚脫氧胸苷纖維素
2%戊二醛固著液(Glutaraldehyde)50毫升0.2ml薄壁管
Carnoy固著液50毫升1000ul無菌盒裝吸頭
Zinc固著液50毫升2-甲氧基
Formol sublimate固著液50毫升亞麻酸甲酯
Hollande固著液50毫升氫氧化鋇
Acetic alcohol固著液50毫升人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒,ADRA1A ELISA
Susa 固著液50毫升人D受體(VD R)ELISA試劑盒,
Bouin固著液50毫升人錨蛋白B(Ank-B)ELISA試劑盒,
Orth固著液50毫升小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒,
Helly 固著液50毫升兔子血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA試劑盒,
B5固著液50毫升精雙水解酶試驗用培養(yǎng)基(AD)生化培養(yǎng)基
Lowy FMA固著液50毫升瑞 氏染色液
HARTMAN固著液50毫升D-谷