產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Caspase 3 (CASP3) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-23 08:39:09瀏覽次數(shù):285
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Caspase 3 (CASP3) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介紹:
CPP32; CPP32B; SCA1; Apoptain; Yama; Apoptosis-Related Cysteine Peptidase; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 3; SREBP cleavage activity 1 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 酶與激酶 細(xì)胞凋亡 腫瘤免疫 感染免疫 物種:Homo sapiens (Human,人) 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:7.1 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
胱天蛋白酶3(CASP3)活性蛋白 | Active Caspase 3 (CASP3) | Homo sapiens (Human,人) |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
過氧化還原酶4(PRDX4)重組蛋白Recombinant Adenylate Cyclase 7 (ADCY7)
過氧化還原酶3(PRDX3)重組蛋白Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 3 (PSMC3)
過氧化還原酶2(PRDX2)重組蛋白Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 2 (PSMC2)
過氧化還原酶1(PRDX1)重組蛋白Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 4 (PSMC4)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ribonuclease H產(chǎn)品名稱: 傷菌核糖核suanmeiH抗體交叉反應(yīng): Mouse
EPR1產(chǎn)品名稱: 效應(yīng)細(xì)胞蛋白mei受體1抗體交叉反應(yīng): Human
C6orf62產(chǎn)品名稱: 6號染色體開放閱讀框62抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Rabbit, Sheep
ELOVL4產(chǎn)品名稱: 長鏈脂肪suan延長meiELOVL4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
PCK1產(chǎn)品名稱: 磷suan烯醇suan羧激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
MGST1產(chǎn)品名稱: 微粒體S轉(zhuǎn)移mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
BCAR1交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse
SLC40A1產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白FP1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit
PCDHB1產(chǎn)品名稱: 原鈣粘附蛋白β1抗體產(chǎn)品別名: PCDH β1; PCDH-β1.
NGFB產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)生長因子β單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse
胱天蛋白酶3(CASP3)活性蛋白兔子基質(zhì)金屬蛋白mei3(MMP-3)ELISA試劑盒MMP-3基質(zhì)金屬蛋白mei3ELISA試劑盒Rabbit matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA Kit
兔子基質(zhì)金屬蛋白mei13(MMP-13)ELISA試劑盒MMP-13基質(zhì)金屬蛋白mei13elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit Matrix Metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA Kit
兔子胱天蛋白mei3(Casp-3)ELISA試劑盒Casp-3胱天蛋白mei3elisa檢測試劑盒Rabbit Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit
兔子骨形成蛋白2(BMP2)ELISA試劑盒BMP2骨形成蛋白2elisa kitRabbit Bone morphogenetic protein 2,BMP2 ELISA kit
兔子骨膠原交聯(lián)/Ⅰ型膠原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒Cr/CTX-Ⅰ骨膠原交聯(lián)/Ⅰ型膠原C端肽ELISA試劑盒Rabbit Crosslaps,Cr/CTX-Ⅰ ELISA Kit
注意事項:
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作