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          中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)真核蛋白

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          更新時(shí)間:2023-03-22 21:34:08瀏覽次數(shù):407

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Eukaryotic Neutrophil Elastase (NE)
          種屬 Mus musculus (Mouse,小鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)真核蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:類胰(TPS)重組蛋白英文名稱:Recombina Tryptase (TPS)類胰(TPS)重組蛋白英文名稱:Recombina Tryptase (TPS)類胰(TPS)重組蛋白英文名稱:Recombina Tryptase (TPS)

          詳細(xì)介紹

          商品介紹:

          ELANE; HLE; HNE; ELA2; PMN-E; Neutrophil Elastase; Medullasin; Polymorphonuclear Leukocyte Elastase; Bone Marrow Serine Protease; Human Leukocyte Elastase; PMN Elastase

          酶與激酶

          感染免疫

          物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          來源:真核表達(dá)

          宿主293F Cell

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì), 細(xì)胞外基質(zhì)

          預(yù)測分子量:21.7kDa

          實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:Ser27~Asn265 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點(diǎn):9.6

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)真核蛋白

          Eukaryotic Neutrophil Elastase (NE)

          Mus musculus (Mouse,小鼠)

          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          圖片5.png

          圖片1.png


          相關(guān)產(chǎn)品:

          鞘氨醇激酶2(SPHK2)重組蛋白R(shí)ecombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)

          鞘氨醇激酶1(SPHK1)重組蛋白R(shí)ecombinant Fatty Acid Desaturase 2 (FADS2)

          羥酸氧化酶2(HAO2)重組蛋白R(shí)ecombinant Fatty Acid Desaturase 3 (FADS3)

          羥酸氧化酶1(HAO1)重組蛋白R(shí)ecombinant Hyaluronan Synthase 2 (HAS2)   
          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          SLC5A11產(chǎn)品名稱: 碳suan氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A11抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat

          PEG10產(chǎn)品名稱: 高表達(dá)基因抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

          HRSP12產(chǎn)品名稱: 熱反應(yīng)蛋白12抗體交叉反應(yīng): Mouse

          OR52D1產(chǎn)品名稱: 嗅覺受體52D1抗體交叉反應(yīng): Human

          ZBTB7C產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白ZBTB7C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Sheep

          LRIG1產(chǎn)品名稱: LRIG1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          MAL產(chǎn)品名稱: MAL蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Rat

          EGFL8產(chǎn)品名稱: 表皮生長因子樣蛋白8抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit, Sheep

          ABI3產(chǎn)品名稱: ABI基因家族2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

          Ki-67產(chǎn)品名稱: Ki-67單克隆抗體交叉反應(yīng): Human   

          中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)真核蛋白小鼠醛脫氫mei9家族成員A1(ALDH9A1)ELISA試劑盒ALDH9A1醛脫氫mei9家族成員A1ELISA試劑盒Mouse Aldehyde Dehydrogenase 9 Family, Member A1(ALDH9A1)ELISA Kit

          小鼠趨化因子C-C-基元受體8(CCR8)ELISA試劑盒CCR8趨化因子C-C-基元受體8elisamei聯(lián)免疫試劑盒Mouse Chemokine C-C-Motif Receptor 8(CCR8)ELISA Kit

          小鼠氫/鉀離子交換ATPmeiβ肽(ATP4β)ELISA試劑盒ATP4β氫/鉀離子交換ATPmeiβ肽elisa檢測試劑盒Mouse ATPase, H+/K+ Exchanging Beta Polypeptide(ATP4b)ELISA Kit

          小鼠氫/鉀離子交換ATPmeiα肽(ATP4α)ELISA試劑盒ATP4α氫/鉀離子交換ATPmeiα肽elisa kitMouse ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide(ATP4a)ELISA Kit

          小鼠鞘氨醇1磷suan酯裂解mei1(SGPL1)ELISA試劑盒SGPL1鞘氨醇1磷suan酯裂解mei1ELISA試劑盒Mouse Sphingosine 1 Phosphate Lyase 1(SGPL1)ELISA Kit  
          注意事項(xiàng):

          1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作 

           


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