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          上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>重組蛋白/RP>>N-乙酰神經(jīng)氨酰酸磷酸酶(NANP)重組蛋白

          N-乙酰神經(jīng)氨酰酸磷酸酶(NANP)重組蛋白

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          更新時(shí)間:2023-03-22 21:02:05瀏覽次數(shù):386

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant N-Acetylneuraminic Acid Phosphatase (N
          物種 Mus musculus (Mouse,小鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          N-乙酰神經(jīng)氨酰酸磷酸酶(NANP)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:牡蠣包拉米蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Bonamia ostreae牡蠣皰疹病毒(OsHV)核suan檢測(cè)試劑盒牡蠣皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒Ostreid Herpesvirus Type 1(OsHV-1)牡蠣皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒Ostreid herpesvirus(OsHV)牡蠣包拉米蟲探針法熒光定量

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱:N-乙酰神經(jīng)氨酰酸磷酸酶(NANP)重組蛋白   

          物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          英文名稱:Recombinant N-Acetylneuraminic Acid Phosphatase (NANP)

          C20orf147; HDHD4; Haloacid Dehalogenase-Like Hydrolase Domain Containing 4; Neu5Ac-9-Pase

          酶與激酶

          物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          來源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

          亞細(xì)胞定位::n/a

          預(yù)測(cè)分子量:31.5kDa

          實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:Met1~Val248 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 90%

          等電點(diǎn):5.7

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

          特點(diǎn):

          標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。

          酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。

          熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

          相關(guān)產(chǎn)品:
          拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱβ(TOP2b)重組蛋白R(shí)ecombinant Neuraminidase (NEU)

          拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白R(shí)ecombinant Cytosolic Phospholipase A2 (PLA2G4)

          脫支酶同源物1(DBR1)重組蛋白R(shí)ecombinant Prostaglandin D2 Synthase (PTGDS)

          脫氧胸苷酸激酶(DTYMK)重組蛋白R(shí)ecombinant Solute Carrier Family 25 Member 20 (SLC25A20)

          圖片6.png

          標(biāo)簽選擇:

          親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

          b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

          c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

          d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

          e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

          f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

          g.      大量表達(dá)

          h.      親和純化

          i.        檢測(cè)和鑒定

          原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

          e.      蛋白表達(dá)小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

          GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)

            誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

          SPINK7產(chǎn)品名稱: 食道相關(guān)基因抗體交叉反應(yīng): Human

          LRRC23產(chǎn)品名稱: LRRC23蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit, Sheep

          Kv2.2產(chǎn)品名稱: 電壓門控性鉀通道Kv2.2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Sheep

          phospho-eIF4EBP1 (Ser65 + Thr70)產(chǎn)品名稱: eIF4E結(jié)合蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

          CRISP10產(chǎn)品名稱: 富含半胱氨suan分泌蛋白10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

          GNA13交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse

          MARVELD2產(chǎn)品名稱: MARVEL蛋白家族D2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Monkey, Chimpanzee

          ZMAT1產(chǎn)品名稱: 型鋅指蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit

          RFESD產(chǎn)品名稱: RFESD蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          BRN3A產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體產(chǎn)品別名: Brn3α;
          N-乙酰神經(jīng)氨酰酸磷酸酶(NANP)重組蛋白Ⅱ型前膠原(PCⅡ)ELISA試劑盒PCⅡⅡ型前膠原elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Procollagen II(PCII)ELISA Kit

          Ⅱ類主要組織相容性復(fù)合體DQβ1(MHCDQβ1)ELISA試劑盒MHCDQβ1Ⅱ類主要組織相容性復(fù)合體DQβ1elisa檢測(cè)試劑盒Human Major Histocompatibility Complex Class II DQ Beta 1(MHCDQb1)ELISA Kit

          Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體G(MHCG)ELISA試劑盒MHCGⅠ類主要組織相容性復(fù)合體Gelisa kitHuman Major Histocompatibility Complex Class I G(MHCG)ELISA Kit

          Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體E(MHCE)ELISA試劑盒MHCEⅠ類主要組織相容性復(fù)合體EELISA試劑盒Human Major Histocompatibility Complex Class I E(MHCE)ELISA Kit

          Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體C(MHCC)ELISA試劑盒MHCCⅠ類主要組織相容性復(fù)合體Celisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Major Histocompatibility Complex Class I C(MHCC)ELISA Kit
          操作步驟

          根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

          b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

          c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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