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          組織蛋白酶A(CTSA)活性蛋白

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          • 組織蛋白酶A(CTSA)活性蛋白

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          更新時(shí)間:2023-03-23 08:36:26瀏覽次數(shù):277

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Active Cathepsin A (CTSA)
          物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          組織蛋白酶A(CTSA)活性蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:腦膜瘤表達(dá)抗原5(MGEA5)重組蛋白英文名稱:Recombina Meningioma Expressed Aigen 5 (MGEA5)肝sumei(HPSE)重組蛋白英文名稱:Recombina Heparanase (HPSE)N-乙酰半乳糖胺meiα(NAGa)重組蛋白英文名稱:Recombina N-Acetylgalactosaminida

          詳細(xì)介紹

          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          組織蛋白酶A(CTSA)活性蛋白

          Active Cathepsin A (CTSA)

          Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          商品介紹:

          CTS-A; GLB2; GSL; NGBE; PPCA; PPGB; Protective Protein For Beta-Galactosidase; Galactosialidosis; Carboxypeptidase C; Carboxypeptidase L

          酶與激酶

          物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 90%

          等電點(diǎn):7.0

          應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

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          相關(guān)產(chǎn)品:

          含銅胺氧化酶3(AOC3)重組蛋白Recombinant Junctional Adhesion Molecule 2 (JAM2)

          含銅胺氧化酶2(AOC2)重組蛋白Recombinant Matrix Metalloproteinase 17 (MMP17)

          含黃素單加氧酶2(FMO2)重組蛋白Recombinant Arachidonate-12-Lipoxygenase (ALOX12)

          含黃素單加氧酶1(FMO1)重組蛋白Recombinant Cyclin Dependent Kinase 6 (CDK6)   

          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          注意事項(xiàng):

          1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時(shí)請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作 
          ZNF641產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白641抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          MIF4GD產(chǎn)品名稱: MIF4GD蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig, Cat

          UQCRC2產(chǎn)品名稱: 線粒體輔mei細(xì)還原mei核心蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit

          CYP11B2產(chǎn)品名稱: 醛固酮合成meiCYP11B2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          Desmocollin 1 + 2產(chǎn)品名稱: 橋粒糖蛋白1/2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

          SNIP1產(chǎn)品名稱: Smad核相互作用蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

          glycoprotein tag; VSV epitope tag; VSV tag; VSV-G epitope tag; VSVG; vsvg tag; VSV-G-Tag.

          HDGF產(chǎn)品名稱: 衍生生長因子/高遷移率族蛋白1樣蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, GuineaPig

          Myocardin產(chǎn)品名稱: 促平滑肌細(xì)胞分化因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

          LYPD5產(chǎn)品名稱: LYPD5蛋白抗體交叉反應(yīng): Human   

          組織蛋白酶A(CTSA)活性蛋白大鼠Ⅸ型膠原α1(COL9α1)ELISA試劑盒COL9α1Ⅸ型膠原α1ELISA試劑盒Rat Collagen Type IX Alpha 1(COL9a1)ELISA Kit

          大鼠5-羥色胺受體2C(HTR2C)ELISA試劑盒HTR2C5-羥色胺受體2Celisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat 5-Hydroxytryptamine Receptor 2C(HTR2C)ELISA Kit

          大鼠3-羥基3-甲基戊二酰輔meiA還原mei(HMGCR)ELISA試劑盒HMGCR3-羥基3-甲基戊二酰輔meiA還原meielisa檢測試劑盒Rat 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Coenzyme A Reductase(HMGCR)ELISA Kit

          兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒TFPI兔組織因子途徑抑制物elisa kitRabbit Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit

          兔總(TC)ELISA試劑盒TC兔總ELISA試劑盒Rabbit Total Cholesterol/TC ELISA Kit  


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