磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:環(huán)氧化合物水解mei4(EPHX4)重組蛋白英文名稱：Recombina Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)γ-分泌激活蛋白(gSAP)重組蛋白英文名稱：Recombina Gamma-Secretase Activating Protein (gSAP)透明質(zhì)suan氨基葡糖苷mei1(HYAL1)重組蛋白英文名稱：Reco

公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！

商品介紹：

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

相關(guān)產(chǎn)品：

基質(zhì)金屬蛋白酶24(MMP24)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 24 (MMP24)Homo sapiens (Human，人)

基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 25 (MMP25)Homo sapiens (Human，人)

基質(zhì)金屬蛋白酶26(MMP26)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 26 (MMP26)Homo sapiens (Human，人)

基質(zhì)金屬蛋白酶28(MMP28)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 28 (MMP28)Homo sapiens (Human，人)   

注意事項：

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

P15RS產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞周期依賴性激mei相關(guān)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse

TNF alpha(1F6)產(chǎn)品名稱: 腫壞死因子-α單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

Cytochrome b245 Light Chain產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞色sub245輕鏈抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

FITM2產(chǎn)品名稱: FITM2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

Phospho-RASGRF1 (Ser929)產(chǎn)品名稱: Ras特異性核苷suan釋放因子1交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep

LAMP2產(chǎn)品名稱: 溶mei體相關(guān)膜蛋白2（CD107B）抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

Chromogranin C產(chǎn)品名稱: 嗜鉻粒蛋白C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse

SFTPA1產(chǎn)品名稱: 肺表面活性蛋白A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

IL-6R alpha產(chǎn)品名稱: 白細(xì)胞介su6受體α/IL-6Rα抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse

Lymphotactin產(chǎn)品名稱: 淋巴細(xì)胞趨化因子抗體交叉反應(yīng): Human   

磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)重組蛋白人多藥耐藥關(guān)聯(lián)蛋白1(MRP1)ELISA試劑盒MRP1多藥耐藥關(guān)聯(lián)蛋白1elisa檢測試劑盒Human Multidrug Resistance Associated Protein 1(MRP1)ELISA Kit

人多型性腺瘤基因樣蛋白1(PLAGL1)ELISA試劑盒PLAGL1多型性腺瘤基因樣蛋白1elisa kitHuman Pleiomorphic Adenoma Gene Like Protein 1(PLAGL1)ELISA Kit

人多效調(diào)節(jié)因子1(PLRG1)ELISA試劑盒PLRG1多效調(diào)節(jié)因子1ELISA試劑盒Human Pleiotropic Regulator 1(PLRG1)ELISA Kit

人多萜醇磷suan-N-乙酰氨基葡萄糖磷suan轉(zhuǎn)移mei1(DPAGT1)ELISA試劑盒DPAGT1多萜醇磷suan-N-乙酰氨基葡萄糖磷suan轉(zhuǎn)移mei1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Dolichyl Phosphate-N-Acetylglucosaminephosphotransferase 1(DPAGT1)ELISA Kit

人多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移mei9(GALNT9)ELISA試劑盒GALNT9多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移mei9elisa檢測試劑盒Human Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 9(GALNT9)ELISA Kit