產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-21 18:19:54瀏覽次數(shù):206
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)
酶與激酶
心腦血管
物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::n/a 預測分子量:32.8kDa 實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Leu469~Glu721 (Accession # P42892) with 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點:- 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關產(chǎn)品:
Recombinant Human GNMT宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Mouse CXCL5宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Mouse
Recombinant Human AHI1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Rat Leptin宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Rat
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測
誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標記:標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結合是一種非常簡便、直接的標記方法。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,結果即時可見、敏感性高。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。
phospho-Androgen Receptor (Ser213)產(chǎn)品名稱: 雄激su受體抗體交叉反應: Human
alpha smooth muscle Actin產(chǎn)品名稱: 肌動蛋白α/α-SMA/α Actin單克隆抗體產(chǎn)品別名: α-Smooth Muscle Actin; α Smooth Muscle Actin;
Phospho-NMDAR2A + 2B (Tyr1246 + Tyr1252)產(chǎn)品名稱: 谷氨suan受體2A+2B抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
phospho-TPH (Ser260)產(chǎn)品名稱: 色氨suan羥化mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Ferritin Heavy Chain/FTH1產(chǎn)品名稱: 抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
phospho-ATF2 (Ser322)產(chǎn)品名稱: 活化復制因子2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit
phospho-ADRB2 (Ser346)產(chǎn)品名稱: 腎上su能受體β2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Sheep
Wnt3a產(chǎn)品名稱: 信號通路Wnt3a抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig
RNF150產(chǎn)品名稱: 環(huán)指蛋白150抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit, Sheep
ZNF37A產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白37A抗體交叉反應: Human
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)重組蛋白人視黃suan誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)ELISA試劑盒RLR視黃suan誘導基因/RIG-1樣受體ELISA試劑盒Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA Kit
人生長相關蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒GAP-43生長相關蛋白43elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit
人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑su瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒GROγ/CXCL3/MGSA生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑su瘤生激因子elisa檢測試劑盒Human growth-regulated oncogeneγ/melanoma growth stimulating activity,GROγ/MGSA ELISA Kit
人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑su瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒GROβ/CXCL2/MGSA生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑su瘤生激因子elisa kitHuman growth-regulated oncogeneβ/melanoma growth stimulating activity,GROβ/MGSA ELISA Kit
人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑su瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒GROα/CXCL1/MGSA生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑su瘤生激因子ELISA試劑盒Human growth-regulated oncogeneα/melanoma growth stimulating activity,GROα/MGSA ELISA Kit