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產(chǎn)品名稱(chēng)：類(lèi)黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT）測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號(hào)：YS-01S6715
測(cè)定意義
花色苷是一類(lèi)易溶于極性溶劑的天然色素，屬黃酮類(lèi)化合物?；ㄉ諒V泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實(shí)中，使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色，是植物主要的呈色物質(zhì)。
類(lèi)黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶（UDP-glycose flavonoid glycosyltransferase, UFGT）是花色苷合成過(guò)程的最后一個(gè)酶，可以把不穩(wěn)定的花色素催化成花色苷，在一定范圍內(nèi)，UFGT活性與花色素苷的合成呈現(xiàn)正相關(guān)。
測(cè)定原理：
UFGT催化UDPG與槲皮素生成UDP；UDP在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下，氧化NADH為NAD+，NAD+生成速度與UDP含量成正比，通過(guò)340nm吸光度下降速度反映UFGT活性。
需自備的儀器和用品：
酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔酶標(biāo)板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過(guò)濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 。
4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Anti-CD72/Ly-32/FITC 熒光素標(biāo)記CD72抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NGF- Beta 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β(多肽片斷抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體 Anti-Socs 3 0.2ml
SCYL1BP1 英文名稱(chēng)： SCYL結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
EPHB4 英文名稱(chēng)： 酪酸蛋白激酶受體B4抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAPKAPK2(Ser272) 磷酸化原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
NGF- Beta 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β(多肽片斷抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
PALB2(partner and locaizer of BRCA2) 癌易感基因相關(guān)蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-AT1R (Whole serum) 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-APP/ABPP(Thr668) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Stat5a 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UBE2C 英文名稱(chēng)： 泛素蛋白連接酶C抗體 0.2ml
DEPTOR 英文名稱(chēng)： DEPTOR蛋白抗體 0.2ml
Anti-AT1R (Whole serum) 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SDF4 英文名稱(chēng)： 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4抗體(鈣結(jié)合蛋白) 0.2ml
EFHC1 英文名稱(chēng)： EFHC1蛋白抗體 0.2ml
兔抗大鼠sIgA抗體 Anti-Rat IgA 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /Biotin 生物素標(biāo)記 壞死因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MK3(Thr222) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶3抗體 規(guī)格 0.1ml
Isulin 胰島素(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
類(lèi)黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT）測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)基二甲基氯硅烷(>99.0%(GC))銀杏內(nèi)酯 C (暫行)組織絡(luò)氨酸磷酸酶（TP）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
二甲基異基氯硅烷(>90.0%(GC))白果內(nèi)酯絡(luò)氨酸磷酸酶（TP）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
1-(二甲基異基硅基)咪唑(>98.0%(T))銀杏葉對(duì)照提取物組織絡(luò)氨酸磷酸酶（TP）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
(溴甲基)二甲基氯硅烷(>95.0%(GC))丹參酮 I酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
1,3-雙(氯甲基)甲基二硅氮烷(>95.0%(GC))三七總皂苷組織酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
氯代(氯甲基)二甲基硅烷(>98.0%(GC))三七莖葉皂苷體液酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
烯基二甲基氯硅烷(>96.0%(GC))精氨酸植物酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
1,3-二苯基甲基二硅氮烷(>95.0%(GC))氨酸/酵母酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
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