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          上海研生實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氨基酸代謝系列>>吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)測試盒說明書

          吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)測試盒說明書

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          • 吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)測試盒說明書

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-03-11 08:49:09瀏覽次數(shù):252

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/24樣、100管/48樣
          貨號 YS-01S6423 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
          吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)測試盒說明書的相關(guān)產(chǎn)品:磷酸化乙酰A羧化酶抗體Anti-CLCA4 鈣活氯離子通道4抗體
          磷酸化乙酰A羧化酶抗體Anti-CLEC1/CLEC1A C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體
          磷酸化腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體Anti-CLEC2/CLEC1B C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體
          磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-C-Mer/MERTK c-mer原癌

          詳細介紹

          【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

          產(chǎn)品名稱:吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)測試盒說明書

          規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣

          測試方法:微量法、可見分光光度法

          貨號:YS-01S6423

          測定意義

          脯氨酸是植物體內(nèi)適應(yīng)逆境脅迫的一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同,分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以谷氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關(guān)鍵酶,對植物適應(yīng)逆境脅迫起關(guān)鍵作用。

          測定原理:

          吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨酸生成P5C過程中分解ATP生成ADP和無機磷,通過鉬酸銨比色法測定單位時間內(nèi)產(chǎn)生無機磷的量可確定P5CS活性。

          需自備的儀器和用品:

          可見外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

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          樣品制備:

          1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。

          2). 過濾混濁溶液。

          3). 除去樣品中的CO 2 。

          4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

          5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。

          6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。

          7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

          8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。

          9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

          10).含脂肪的樣品用熱水提取。

          特點:

          (1)應(yīng)用廣泛

          由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

          (2)靈敏度高

          由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。

          (3)選擇性好

          目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

          (4)準確度高

          對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

          (5)適用濃度范圍廣

          可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

          (6)分析成本低、操作簡便、快速

          Anti-TCF7L2/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Leptin 瘦素(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體 anti-SFRP1 0.2ml

          Phospho-Syk (Tyr525 + Tyr526) 英文名稱: 磷酸化非受體型酪酸蛋白激酶抗體 0.1ml

          E2F7 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子E2F7抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-MEF2A (Thr312) 磷酸化肌細胞增強因子2抗體 規(guī)格 0.1ml

          Leptin 瘦素(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Leptin 瘦素(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          Anti-CD2 CD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh PAI-2/SerpinB2 纖溶酶原激活物抑制因子2抗體(血漿酶原激活酶抑制因子-2) 規(guī)格 0.1ml

          COQ7 Kit Human 人 COQ7 ELISA配對抗體 ELISA

          Tsg101 英文名稱: 易感基因101蛋白抗體 0.1ml

          C6orf150 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框150抗體 0.1ml

          Anti-CD2 CD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          SRRM2 英文名稱: 絲酸/精酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白2抗體 0.1ml

          phospho-EGFR (Tyr1016) 英文名稱: 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml

          樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細胞粘附分子樣蛋白抗體 Anti-OPCML 1ml

          Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 熒光素標記磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Tyr1336) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體 規(guī)格 0.1ml

          c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
          吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)測試盒說明書草酸一水(>98%,BC)黃芩素 組蛋白H2A-T120磷酸化檢測試劑盒

          過酸(>99%,BR)秦皮素 組蛋白H2A-T129磷酸化檢測試劑盒

          氫鈉一水(>98%,BR)秦皮甲素 組蛋白H3-T3磷酸化檢測試劑盒

          硫酸鈉十水(>99%,BC)秦皮乙素 組蛋白H3-T11磷酸化檢測試劑盒

          司班40綠原酸 組蛋白H3-T45磷酸化檢測試劑盒

          鹽酸酪新綠原酸 組蛋白H3-S10磷酸化檢測試劑盒

          糠酸(>97%,BR)隱綠原酸 組蛋白H3-S28磷酸化檢測試劑盒

          2-甲基咪唑(>98%,BR)異綠原酸A 組蛋白H3-S31磷酸化檢測試劑盒
          操作步驟:

          實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

          1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

          2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

          3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

          4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

          5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

          6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

          7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。


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