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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Protein O-Mannosyltransferase 1 (POMT1 |
| 物種 | Homo sapiens (Human，人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細介紹
公司產品僅供科研使用，不得用于臨床！
產品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
蛋白O-甘露糖基轉移酶1(POMT1)重組蛋白 | Recombinant Protein O-Mannosyltransferase 1 (POMT1) | Homo sapiens (Human，人) |
商品介紹：
RT; LGMD2K; Dolichyl-phosphate-mannose--protein mannosyltransferase 1 酶與激酶 物種：Homo sapiens (Human，人) 來源：原核表達 宿主E.coli 內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位：：細胞膜 預測分子量：26.1kDa 實際分子量：26kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽：Pro318~His513 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 95% 等電點：7.6 應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
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肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白英文名稱：Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)Homo sapiens (Human，人)
注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
MGAT5產品名稱: 糖蛋白GNTVA抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Rabbit
ANKRD28產品名稱: 錨蛋白重復域28抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
AD7c-NTP產品名稱: 神經絲蛋白單克隆抗體交叉反應: Human
Bone Sialoprotein產品名稱: 骨涎蛋白交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, GuineaPig
CEP63產品名稱: 中心體蛋白63抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
C1orf96產品名稱: 1號染色體開放閱讀框96抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse, Rabbit
RBM15產品名稱: RNA結合蛋白15抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
應用類型: Other英文名稱: Ephrin B2英文別名: EFN B2; EFNB 2; Efnb2; EFNB2_HUMAN; Eph related receptor tyrosine kinase ligand 5; EPH-related receptor tyrosine kinase ligand 5; ephrin B2; Ephrin-B2; EphrinB2; EPLG 5; EPLG5; Htk L; HTK ligand; HTK-L; HTKL; LERK 5; LERK-5; LERK5; Ligand of eph related kinase 5; MGC126226; MGC126227; MGC126228; OTTMUSP00000024973.
SORCS2產品名稱: 液泡蛋白分選受體SORCS2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
FAM193A產品名稱: FAM193A蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
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人二肽mei2(DPEP2)ELISA試劑盒DPEP2二肽mei2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Dipeptidase 2(DPEP2)ELISA Kit
人二肽基肽mei7(DPP7)ELISA試劑盒DPP7二肽基肽mei7elisa檢測試劑盒Human Dipeptidyl Peptidase 7(DPP7)ELISA Kit
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