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          小鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

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          更新時(shí)間:2022-03-23 11:01:50瀏覽次數(shù):207

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mL/125mL×4
          貨號(hào) YS-02X10255 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          小鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品:兜甲蛋白抗體Anti-KLK7/FITC 熒光素標(biāo)記肽釋放酶7抗體IgG
          脂肪堆積和肥胖相關(guān)蛋白抗體Anti-KLK9/FITC 熒光素標(biāo)記肽釋放酶9抗體IgG
          鳥嘌呤核苷酸交換因子FARP2抗體Anti-KLK10/FITC 熒光素標(biāo)記肽釋放酶10抗體IgG
          FK506結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白抗體(他克莫司相關(guān)蛋白)Anti-KLK14/FITC 熒

          詳細(xì)介紹

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          產(chǎn)品名稱:小鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

          規(guī)格:100mL/125mL×4
          貨號(hào):YS-02X10255

          細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常

          儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,避光儲(chǔ)存

          運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          細(xì)胞培養(yǎng)步驟

          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

          1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。

          2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

          3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

          二. 細(xì)胞處理:

          1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

          2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          注意事項(xiàng):

          1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;

          2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。

          3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。

          4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。

          5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

          使用步驟:

          一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

          (二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

          (三)過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

          (四)分裝:將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。

          (五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。

          細(xì)胞特性:

          1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

          2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

          3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

          4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

          5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
          Beta2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit 大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/MMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

           VAT 囊泡乙酰膽堿通道抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh GAS7/Growth Arrest Specific Protein 7 生長(zhǎng)休止特定蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml

          SLC/CCL21(Human secondary lymphoid-tissue chemokine) ELISA Kit 人二級(jí)組織趨化因子 96T

          NF1 英文名稱: 1型神經(jīng)纖維瘤抗體 0.1ml

          APOE3 英文名稱: 載脂蛋白E3抗體 0.2ml

           VAT 囊泡乙酰膽堿通道抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          ACAST-D IV (Human autoantibodies against the C-terminal domain IV ) ELISA Kit 人抗鈣蛋白酶抑素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

           IGF I 胰島素樣生長(zhǎng)因子I抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh MAGP2 纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml

          ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異性堿性磷酸酶B 96T

          RUBISCO 英文名稱: 核酮糖1,5二磷酸羧化酶抗體 0.1ml

          CHI3L1 英文名稱: 軟骨糖蛋白39抗體 0.1ml

           IGF I 胰島素樣生長(zhǎng)因子I抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Mouse  rat IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

          GRIK3 英文名稱: 谷酸受體紅藻酸離子3/谷酸受體7抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh 14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon) 14-3-3蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

            Alpha-MSH/POMC /FITC 熒光素標(biāo)記α黑素細(xì)胞刺/阿黑皮素原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh PSMD10/Proteasome 26S S10 蛋白酶調(diào)解因子10抗體 規(guī)格 0.2ml

           Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標(biāo)記抑素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          小鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基電擊法酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒20次BOC-L-天冬

          酵母菌落直接PCR檢測(cè)試劑盒20/50次胰凝乳蛋白酶(牛)

          酵母細(xì)胞溶解試劑盒20次卵白素(雞蛋)

          酵母細(xì)胞凍存試劑盒50次透明質(zhì)酸鈉

          酵母菌YPD培養(yǎng)基100毫升青霉素鈉

          酵母菌YPD培養(yǎng)基500毫升替卡西林鈉

          酵母菌DOB培養(yǎng)基100毫升*紅霉素

          酵母菌DOBA培養(yǎng)基100毫升2′-氟脫氧胞苷

          酵母菌YNB培養(yǎng)基100/500毫升脫氧核糖核酸(魚精)

          酵母菌YNBA培養(yǎng)基100毫升菊糖

          酵母菌SD-G培養(yǎng)基100毫升熒光

          10倍酵母菌SD-G培養(yǎng)基100毫升對(duì)氨基

          酵母菌SD-GAL/RAF培養(yǎng)基100毫升N,N,N,N-甲基乙二

          10倍酵母菌SD-GAL/RAF培養(yǎng)基100毫升聚酰

          酵母菌SD-LEU/TRP培養(yǎng)基100毫升水楊酸鈉


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