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          牛痘相關(guān)激酶1(VRK1)重組蛋白

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          更新時(shí)間:2023-03-21 21:07:47瀏覽次數(shù):219

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Vaccinia Related Kinase 1 (VRK1)
          種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          牛痘相關(guān)激酶1(VRK1)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:氨酰tRNA合成mei復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)重組蛋白英文名稱:Recombina Aminoacyl tRNA Syhetase Complex Ieracting Multifunctional Protein 1 (AIMP1)醌NADH脫氫mei1(NQO1)重組蛋白英文名稱:Recombina NADH Dehydrogenas

          詳細(xì)介紹

          商品介紹:

          Serine/threonine-protein kinase VRK1

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來(lái)源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

          亞細(xì)胞定位::n/a

          預(yù)測(cè)分子量:29.9kDa

          實(shí)際分子量:34kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

          片段與標(biāo)簽:Gly46~Glu292 (Accession # Q99986) with

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點(diǎn):-

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          牛痘相關(guān)激酶1(VRK1)重組蛋白

          Recombinant Vaccinia Related Kinase 1 (VRK1)

          Homo sapiens (Human,人)

          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          圖片5.png

          圖片1.png


          相關(guān)產(chǎn)品:

          Recombinant Human VIM宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human CD43宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human COX5A宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human RARA宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   
          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Cyclin E1產(chǎn)品名稱: 周期suE抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          NEUROD1產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)細(xì)胞分化因子1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

          ERO1LB產(chǎn)品名稱: Ero1-Lβ蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit, GuineaPig

          ZNF516產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白516抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          Beta Tubulin產(chǎn)品名稱: 微管蛋白抗體產(chǎn)品別名: Tubulin β.

          Ubiquitin產(chǎn)品名稱: 泛su蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig

          phospho-E2F1 (Ser337)產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Horse

          CD31產(chǎn)品名稱: 小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

          CAPN1產(chǎn)品名稱: 鈣蛋白mei1單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

          CD137產(chǎn)品名稱: 腫壞死因子受體超家族成員9抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse   

          牛痘相關(guān)激酶1(VRK1)重組蛋白Ephrin-B2(EFNB2)ELISA試劑盒EFNB2Ephrin-B2ELISA試劑盒Human EFNB2 ELISA kit

          EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成mei抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒EJ/GlyRSEJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成mei抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-EJ-antibody,EJ/GlyRS ELISA Kit

          Egl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)ELISA試劑盒EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137Egl九同源物1elisa檢測(cè)試劑盒Human EGLN1 ELISA kit

          EB病毒早期抗原(EBEA)抗體(IgG)ELISA試劑盒EBEAEB病毒早期抗原elisa kitHuman EBEA IgG ELISA kit

          EB病毒衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgG)ELISA試劑盒EBVCAEB病毒衣殼抗原ELISA試劑盒Human EBVCA IgG ELISA kit  
          注意事項(xiàng):

          1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作 

           


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