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          DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)重組蛋白

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-03-22 10:29:02瀏覽次數(shù):224

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant DNA Methyltransferase 1 (DNMT1)
          物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:哈維氏弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒Vibrio harveyi哈扎拉病毒PCR檢測試劑盒Hazara VirusRTPCR蛤弧菌PCR檢測試劑盒Vibrio tapetisPCR蛤弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒Vibrio tapetis哈扎拉病毒PCR檢測試劑盒

          詳細介紹

          圖片6.png


          公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱:DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)重組蛋白   

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          英文名稱:Recombinant DNA Methyltransferase 1 (DNMT1)

          CXXC9; DNMT; MCMT; Cytosine-5 DNA Methyltransferase 1; CXXC-type zinc finger protein 9; DNA methyltransferase HsaI

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細胞定位::細胞核

          預測分子量:29.6kDa

          實際分子量:32kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標簽:Val1343~Leu1570 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點:9.7

          應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

          相關(guān)產(chǎn)品:
          Recombinant Human PAK6宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human Calreticulin宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human PLAC8宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human CNN2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          標簽選擇:

          親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)

          b.      表達載體的構(gòu)建

          c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

          d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

          e.      表達小試,條件優(yōu)化

          f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

          g.      大量表達

          h.      親和純化

          i.        檢測和鑒定

          原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

          e.      蛋白表達小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

          GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

            誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

          操作步驟

          根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

          b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

          c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

          特點:

          標記:標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標記方法。

          酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。

          熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。

          應用類型: Other英文名稱: PTP1B英文別名: PTN1_HUMAN; Tyrosine-protein phosphatase n-receptor type 1; EC:3.1.3.48; PTPN1; Protein-tyrosine phosphatase 1B (PTP-1B);

          KIR2.3產(chǎn)品名稱: 鉀離子通道KIR2.3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit

          GSK-3 Beta產(chǎn)品名稱: 糖原合mei激mei-3β單克隆抗體產(chǎn)品別名: GSK 3β; GSK 3 β; GSK-3β; GSK3β;

          DSS1產(chǎn)品名稱: 先天性裂手/裂相關(guān)蛋白DSS1抗體交叉反應: Human, Pig, Cow, Rabbit

          UBE2J1產(chǎn)品名稱: 泛su結(jié)合meiE2J1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish, Sheep

          FUT11產(chǎn)品名稱: FUT11蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

          Phospho-FADD (Ser191)產(chǎn)品名稱: Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體交叉反應: Mouse

          TMEM204產(chǎn)品名稱: 跨膜蛋白204抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Sheep

          Glycine Receptor alpha 1 + alpha 2產(chǎn)品名稱: 甘氨suan受體α1+甘氨suan受體α2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

          SHOX2產(chǎn)品名稱: 身材矮小同源盒基因SHOX2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig, Cat
          DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)重組蛋白人四旋蛋白3(TSPAN3)ELISA試劑盒TSPAN3四旋蛋白3elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Tetraspanin 3(TSPAN3)ELISA Kit

          人四旋蛋白27(TSPAN27)ELISA試劑盒TSPAN27四旋蛋白27elisa檢測試劑盒Human Tetraspanin 27(TSPAN27)ELISA Kit

          人四旋蛋白2(TSPAN2)ELISA試劑盒TSPAN2四旋蛋白2elisa kitHuman Tetraspanin 2(TSPAN2)ELISA Kit

          人四旋蛋白1(TSPAN1)ELISA試劑盒TSPAN1四旋蛋白1ELISA試劑盒Human Tetraspanin 1(TSPAN1)ELISA Kit

          人四加半LIM域蛋白1(FHL1)ELISA試劑盒FHL1四加半LIM域蛋白1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Four And A Half LIM Domains Protein 1(FHL1)ELISA Kit


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