化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Phosphofructokinase, Platelet (PFKP) |
| 物種 | Homo sapiens (Human，人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細(xì)介紹
商品介紹：
PFK-C; PFKF; ATP-dependent 6-phosphofructokinase, platelet type; 6-phosphofructokinase type C; Phosphofructo-1-kinase isozyme C; Phosphohexokinase 酶與激酶 代謝通路 物種：Homo sapiens (Human，人) 來源：原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位：：n/a 預(yù)測分子量：26.4kDa 實(shí)際分子量：26kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽：Asp553~Lys753 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點(diǎn)：8.8 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)重組蛋白 | Recombinant Phosphofructokinase, Platelet (PFKP) | Homo sapiens (Human，人) |
蛋白表達(dá)及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品：
Recombinant Human PITX1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human HSP90B1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human PINP宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human Cystatin S宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
操作步驟：
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
BRMS1產(chǎn)品名稱: 乳轉(zhuǎn)移基因1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse
phospho-CSNK1G 1+2+3 ( Tyr263)產(chǎn)品名稱: 酪蛋白激mei1γ1+γ2+γ3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
OLFML1產(chǎn)品名稱: 嗅球蛋白樣蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit, Sheep
phospho-p107 (Ser975)產(chǎn)品名稱: 視網(wǎng)膜母細(xì)胞樣蛋白p107抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
Exportin 1產(chǎn)品名稱: 染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
IL-19產(chǎn)品名稱: 白細(xì)胞介su19抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit
FLIP產(chǎn)品名稱: FLIP抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
應(yīng)用類型: 相關(guān)產(chǎn)品???英文名稱: SARS-CoV-2 () Spike Neutralizing英文別名: SARS-CoV-2 spike protein; Spike protein; Spike glycoprotein; Spike protein S1; Surface glycoprotein; Spike protein RBD; SPIKE_SARS2.
PKM2產(chǎn)品名稱: suan激mei-M2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
ANGPTL2產(chǎn)品名稱: 生成su樣蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)重組蛋白人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA試劑盒CNR-1鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human cadherln-related neuronal receptor1,CNR-1 ELISA Kit
人鈣依賴性胞漿型磷脂meiA2(iPLA2)ELISA試劑盒iPLA2鈣依賴性胞漿型磷脂meiA2elisa檢測試劑盒Human iPLA2 ELISA kit
人鈣調(diào)su特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒CAM-ab鈣調(diào)su特異抗體elisa kitHuman anti-calmodulin specific antibody,CaM-ab ELISA Kit
人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒calnexin鈣聯(lián)蛋白ELISA試劑盒Human calnexin ELISA Kit
人鈣離子通道抗體(IgG)ELISA試劑盒IgG鈣離子通道抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human VGCC IgG ELISA Kit
注意事項(xiàng)：
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
化工儀器網(wǎng)