腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：絲裂原活化蛋白酶3抗體Anti-Phospho-EphA2 (Tyr594) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化酪蛋白酶A2受體抗體IgG
雌受體α抗體Anti-EphA4 R/FITC 熒光素標(biāo)記酪蛋白酶受體A4抗體IgG
雌受體β 抗體Anti-EphA4/FITC 熒光素標(biāo)記抗酪蛋白酶A4抗體IgG
上皮特異性抗原抗體Anti-

產(chǎn)品名稱：腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10088

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

Phospho-SHIP2 (Tyr542)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白酪磷酸酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

AQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

神經(jīng)激肽-B受體抗體  NKR/Neurokin B receptor 0.2ml

SOD2 英文名稱： 超氧化物歧化酶2抗體 0.1ml

ESE1 英文名稱： 上皮細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-p56Dok2(Tyr299) 磷酸化D酪激酶衰減蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml

AQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

NAP 小鼠中性粒細(xì)胞活化肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse  Rabbit IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml

BrdU(Human Bromodeoxyuridine) ELISA Kit 人溴脫氧核苷尿嘧啶 96T

SNX4 英文名稱： 分選連接蛋白4抗體 0.2ml

CEE 英文名稱： 跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體 0.2ml

 Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  rat IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.3ml

FNDC5 英文名稱： Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白2/5抗體 0.2ml

單核-巨噬細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶抗體  CD147/EMMPRIN 0.1ml

 NR2B/NMDAR2B /FITC 熒光素標(biāo)記谷受體2B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PMCA4/Calcium Pump PMCA4 ATPase 細(xì)胞膜鈣ATP酶4抗體 規(guī)格 0.2ml

 CEA/Gold 膠體金離子標(biāo)記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(包被)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基人纖維蛋白原標(biāo)準(zhǔn)溶液鋁鎳合金

人體液微量白蛋白（microalbumin）比濁法定量檢測(cè)試劑盒20次人腫瘤壞死因子β（TNF-β）ELISA試劑盒,TNF-β ELISA kit

人微量白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液人凋亡相關(guān)因子配體（FASL）ELISA試劑盒,FASL ELISA kit

人血液脂蛋白A（lipoprotein A）比濁法定量檢測(cè)試劑盒20次人垂體腺苷酸環(huán)化酶活肽（PACAP）ELISA試劑盒,PACAP ELISA kit

人脂蛋白A標(biāo)準(zhǔn)溶液人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（TFR/CD71）ELISA試劑盒,TFR/CD71 ELISA kit

血小板相關(guān)性抗體（PA IgG）細(xì)胞流式儀檢測(cè)試劑盒10次人Ⅲ型膠原（ColⅢ）ELISA試劑盒,Col Ⅲ ELISA kit

酶聯(lián)檢測(cè)（EIA）分析試劑專題人NOGO-A抗體（Nogo-A Ab）ELISA試劑盒,Nogo-A Ab ELISA kit

名稱規(guī)格人抗腦組織抗體（ABAb）ELISA試劑盒, ABAb ELISA kit

人腦血液補(bǔ)體蛋白C3比濁法定量檢測(cè)試劑盒20次人破傷風(fēng)抗體（Tetanus Ab）ELISA試劑盒,Tetanus Ab ELISA

人補(bǔ)體蛋白C3標(biāo)準(zhǔn)溶液人谷胱甘肽過氧化酶（GSH-Px）ELISA試劑盒, GSH-Px ELISA

人血液補(bǔ)體蛋白C4比濁法定量檢測(cè)試劑盒20次人骨鈣素/骨谷蛋白（OT/BGP）ELISA試劑盒,OT/BGP ELISA

人補(bǔ)體蛋白C4標(biāo)準(zhǔn)溶液人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3（EAR3）ELISA試劑盒,

人血液C－反應(yīng)蛋白（C-RP）比濁法定量檢測(cè)試劑盒20次人二氫嘧啶酶樣3（DPYSL3）ELISA試劑盒,

通用細(xì)胞/組織載玻片制備試劑盒20次人胸苷酸合成酶（TS）ELISA試劑盒,

細(xì)胞/組織多聚賴載玻片制備試劑盒5次人鳥氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶（OCT）ELISA試劑盒,

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。