產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | YS-02X9589 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
磷酸化原癌基因c-Jun抗體Anti-OAS1 寡腺苷酸合成酶-1
氯離子通道蛋白3抗體Anti-OAT-1/SLC22A6 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體
磷酸化周期素E抗體Anti-OAT-1/SLC22A6 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2022-03-16 20:12:33瀏覽次數(shù):223
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | YS-02X9589 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品名稱:大鼠肝上皮樣干細(xì)胞;WB-F344
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9589
細(xì)胞生長實驗 :細(xì)胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
細(xì)胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) Mouse
Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser142) 磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格 0.1ml
總RNA抽提試劑 100ml 國產(chǎn)
ZA20D3 英文名稱: 鋅指蛋白20D3抗體 0.2ml
DLX2 英文名稱: 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX2抗體 0.2ml
SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) Mouse
VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag標(biāo)簽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
8-OHdG 8-羥基脫氧鳥苷抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CK17 (Ser44) 磷酸化細(xì)胞角蛋白17抗體 規(guī)格 0.1ml
羊抗人IgG、IgM、IgA血清 0.6ml 國產(chǎn)
XRCC1 英文名稱: X射線修復(fù)交叉互補蛋白抗體 0.1ml
DcR2 英文名稱: 誘捕受體2抗體 0.1ml
8-OHdG 8-羥基脫氧鳥苷抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SOX22 英文名稱: 核轉(zhuǎn)錄因子SOX22抗體 0.2ml
ERp19 英文名稱: 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp19抗體 0.2ml
細(xì)胞毒性受體NK-p44抗體 CD336/NKp44/NCR2 0.1ml
VIP/FITC 熒光素標(biāo)記血管活性腸肽抗體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GABBR2 (Ser892) 磷酸化G氨基丁酸B型受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
ChRM3 peptide 毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
大鼠肝上皮樣干細(xì)胞;WB-F3445-氟脫氧胞苷瓜蔞皮(栝樓)/酵母β-半乳糖苷酶活性比色法定量檢測試劑盒
5-氟-2‘-脫氧尿苷;氟尿苷雙邊瓜蔞皮/酵母β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒
鳥苷;鳥嘌呤核苷安息香小量/酵母基因組DNA純化試劑盒
鳥嘌呤核苷(標(biāo)準(zhǔn)品)草中量/酵母基因組DNA純化試劑盒
GDPNa2;5’-二磷酸鳥苷二鈉姜黃大量/酵母基因組DNA純化試劑盒
SU11274威靈仙裂解液IX:/酵母裂解液
尿苷;尿嘧啶核苷鉤藤裂解液IX:/酵母強裂解液
尿嘧啶核苷,尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)桂枝/酵母可溶性總蛋白制備試劑盒