詳細介紹
產(chǎn)品名稱:大鼠肝癌細胞 ;H4-II-E-C3
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9849
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
Snake poison Protein/FITC 熒光素標記抗蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CRP (C-reactive protin) C-反應蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
成骨相關轉錄因子抗體 Osx 0.1ml
PIG54 英文名稱: 細胞增殖誘導蛋白54抗體 0.1ml
phospho-EGFR (Tyr1110) 英文名稱: 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2A/NR2A (Tyr1246) 磷酸化谷受體2A抗體 規(guī)格 0.1ml
CRP (C-reactive protin) C-反應蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TLR5/CD285 (Toll-like receptor 5) Toll樣受體5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CA15-3/MUC1 癌相關抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PDLIM1 細胞骨架蛋白C端PDLIM1抗體 規(guī)格 0.2ml
Calponin鈣調節(jié)蛋白 濃縮液 0.1ml 進口分裝
TFF3 英文名稱: 三葉肽因子3抗體 0.1ml
Phospho-CENPA (Ser7) 英文名稱: 磷酸化著絲粒蛋白A 0.1ml
CA15-3/MUC1 癌相關抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Goat Bovine IgG/Cy3 Cy3標記的羊抗IgG 0.1ml
FHL2 英文名稱: 相互作用蛋白FHL2抗體 0.1ml
胃泌素抑制肽抗體 GIP 0.2ml
phospho-c-Jun (Ser243) /FITC 熒光素標記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-SIRT6(Ser338) 磷酸化沉默調節(jié)相關蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit chicken IgM 兔抗雞IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
大鼠肝癌細胞 ;H4-II-E-C3/酵母細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒100次流感病抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒--動物,人
5羥色(5-HT)ELISA試劑盒--動物,人
純化線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒100次載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA試劑盒--動物,人
小鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒,
活體細胞線粒體跟蹤試劑盒100次小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒,
活體細胞線粒體長期跟蹤試劑盒20次兔子球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒,
全血線粒體DNA萃取試劑盒10/20次兔子肝生長因子(HGF)ELISA試劑盒,
全血基因組/線粒體DNA同步萃取試劑盒10/20次膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒--動物,人
純化線粒體DNA萃取試劑盒20次抗流行性出血熱病抗體IgM (EHF)ELISA試劑盒--動物,人
純化線粒體總RNA萃取試劑盒20次抗狂犬病抗體(anti-RV)ELISA試劑盒--動物,人
純化線粒體DNA/RNA同步萃取試劑盒20次腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒--動物,人
細胞/組織線粒體DNA萃取試劑盒10次BPLS瓊脂
動物硬組織線粒體DNA萃取試劑盒10次Candida Elective 瓊脂
細胞/組織基因組/線粒體DNA同步萃取試劑盒10/20次L-賴醋酸
動物血小板線粒體DNA萃取試劑盒10/20次小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒,
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。