大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：真核延伸因子酶2抗體Anti-GLUR2/FITC 熒光素標(biāo)記谷受體2抗體IgG
磷酸化真核延伸因子酶2抗體Anti-GLUR3/FITC 熒光素標(biāo)記谷受體3抗體IgG
真核啟動(dòng)因子2α抗體(eIFα2)Anti-GLUR4/FITC 熒光素標(biāo)記谷受體4抗體IgG
磷酸化一氧化氮合成酶3（內(nèi)皮型）抗體Anti-GLP-1R/FITC 熒光素標(biāo)

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10141

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

AChRab ELISA Kit 大鼠乙酰膽堿受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 XBP-1 細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh G alpha gust Gα gust抗體 規(guī)格 0.2ml

IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子1 96T

NF-ATc4 英文名稱： T細(xì)胞激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體 0.1ml

APPBP1 英文名稱： β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml

 XBP-1 細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PDGF-AB 大鼠血小板衍生生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Phospho-EGFR(Ser1046/1047) 磷酸化表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Myoglobin 肌紅蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit 人血紅蛋白β亞基 96T

SLC10A1 英文名稱： 鈉離子/磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.1ml

(C2F1) 英文名稱： 單克隆抗體 0.1ml

 Phospho-EGFR(Ser1046/1047) 磷酸化表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  Chicken IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.3ml

phospho-FABP4 (Tyr20) 英文名稱： 磷酸化脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 0.1ml

細(xì)胞凋亡抑制因子5抗體  BIRC5/Survivin variant 0.1ml

 NKB/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)激肽 B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PPIG 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體 規(guī)格 0.2ml

 Il-7R a(CD127)/RBITC 羅丹明標(biāo)記白細(xì)胞介素-7受體a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基組織3－羥－3－甲戊二酰A（HMG－COA）還原酶活性直接比色法20次兔尿酶型纖溶酶原活物受體（PLAUR/uPAR）Elisa測定試劑盒

定量檢測試劑盒兔抗平滑肌抗體（ASMA） Elisa測定試劑盒

血液3－羥－3－甲戊二酰A（HMG－COA）還原酶活性直接比色法20次兔子間粘附分子3（ICAM-3/CD50）Elisa測定試劑盒

定量檢測試劑盒骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2抗體流式組化

細(xì)胞3－羥－3－甲戊二酰A（HMG－COA）還原酶活性間接比色法20次成纖維生長因子受體2抗體流式組化

定量檢測試劑盒L-鳥乙酯鹽酸鹽

組織3－羥－3－甲戊二酰A（HMG－COA）還原酶活性間接比色法20次L-胱鹽酸鹽

定量檢測試劑盒15-150kDa精確分子量MARK

血液3－羥－3－甲戊二酰A（HMG－COA）還原酶活性間接比色法20次5-胞苷三磷酸二鈉鹽

定量檢測試劑盒5-鳥苷二磷酸二鈉鹽

3－羥－3－甲戊二酰A（HMG－COA）還原酶待測樣品制備試劑盒20次2′-脫氧胞苷

通用型蘋果酸脫氫酶（MDH）活性比色法定量檢測試劑盒20次山梨酸

細(xì)胞蘋果酸脫氫酶（MDH）活性比色法定量檢測試劑盒20次蘇丹Ⅱ

組織蘋果酸脫氫酶（MDH）活性比色法定量檢測試劑盒20次7B

血液蘋果酸脫氫酶（MDH）活性比色法定量檢測試劑盒20次1-（3-二甲基丙基）-3-乙基碳二亞